尿素溶液(9.5mol/L)

特别提示：包括尿素溶液(9.5mol/L)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：尿素溶液(9.5mol/L)
产品货号：GL1574
产品规格：100ml

用途：
常规溶液

储存条件：室温，12个月

除了尿素溶液(9.5mol/L),，我公司还供应以下相关产品：



名称：植物总蛋白质微量提取试剂盒(SDS-PAGE专用)
货号：BTN81218
规格：30次
本产品用于快速提取微量植物蛋白，用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析。

产品特点：
1.可以处理各种植物材料，包括新鲜或冻干的材料。
2. 操作简单。
3. 能有效去除植物样品中常见的污染。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	30ml
溶液B	240ml
溶液C	1.5ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1．称取植物样品。如果是冰冻干燥的样品，称取50mg。如果是新鲜组织样品，称取100mg。在液氮条件下，用研钵充分研磨成为粉末。
2．将研磨得到的粉末转移到1.5mL的塑料离心管中。
3．加入1mL溶液A，在震荡仪上充分震荡5分钟。
4．室温12000g离心5分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。
5．将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中，在沸水中处理3分钟。
6．冷却至室温后，转移到一个10-15mL塑料离心管中，加入8倍体积的-20℃预冷的溶液B。
7．颠倒混匀后，置于-20℃冰箱中至少60分钟以充分沉淀其中的蛋白质。
8．12000g离心15分钟，去上清液，保留蛋白沉淀。
9．室温晾干之后，加入50μL溶液C并在震荡仪上充分震荡以让蛋白沉淀充分溶解
10．将蛋白溶液在沸水中处理3分钟。
11．室温12000g离心5分钟，上清可以直接用于蛋白浓度测定和SDS-PAGE。


名称：SDS-PAGE电泳液(干粉)
货号：KFS059
规格：10×1L
本产品作为蛋白电泳缓冲液，含有0.25M Tris、1.92M 甘氨酸。适用于变性聚*烯酰胺凝胶电泳。

每个包装单独加蒸馏水溶解，定容到1L 即可使用。

注意事项
配制好的电泳液使用时间不宜超过两周。
回收的电泳液可以重复使用，但为了取得zuì佳的电泳效果，应使用没有使用过的电泳液。
为了您的安全和健康，请做好实验防护工作。

名称：免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液
货号：SY0318
规格：100ml
本品细胞/组织裂解液，WB/IP裂解液，是一种非变性条件下的裂解液，含有sodium pyrophosphate、β-glycerophosphate、EDTA、sodium orthovanadate和leupeptin等多种抑制剂，可以有效抑制蛋白降解，并能维持原有的蛋白间的相互作用。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP和Co-IP等实验。

注意事项
1）需自备PMSF。
2）裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3） 用WB/IP裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用说明：

(一) 细胞样品
1）融解WB/IP裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的zuì终浓度为1mM。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液清洗细胞一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成5×105～1×106个细胞/管，然后再裂解。因为大团的细胞较难裂解充分，而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触，相对比较容易裂解充分。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入100μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150μl或200μl。

（二）组织样品：
1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解WB/IP裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的zuì终浓度为1mM。
3）按照每20mg组织加入100-200μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。