牛支原体抗体ELISA检测试剂盒

牛支原体抗体ELISA检测试剂盒
【主要成分】
组份 数量 规格
包被板 1 块 96T
阴性血清对照 1 管 1ml/管
阳性血清对照 1 管 1ml/管
样品稀释液 1 瓶 50ml/瓶
10×洗液 1 瓶 30ml/瓶
兔抗牛IgG酶标抗体 1 瓶 12ml/瓶
底物显色液 1 瓶 12ml/瓶
终止液 1 瓶 6ml/瓶
说明书 1 份 
牛支原体抗体ELISA检测试剂盒【作用与用途】
适用于牛血清中牛支原体抗体的检测。
【用法与判定】
1、试剂准备
仔细阅读说明书，所有的试剂在使用前需放置于室温至少1小时，使试剂盒恢复到室温。
2、洗涤液的配制
取1 份10×洗液加入到9份双蒸水中，混匀。配好的液体，应在3天内用完。
3、稀释待检血清。用样品稀释液将待检血清做1∶160(VV)倍稀释(建议在1.5ml微量离心管中加入400μl 样品稀释液，吸取2.5μl 待检样品加入该管中充分混匀)。
4、牛支原体抗体ELISA检测试剂盒操作步骤
4.1 加样
包被板上对照和待检样品添加如下所示。
4.2 孵育
将稀释好的样品加入包被板中，100μl/孔。将包被板置37℃下孵育1小时。
4.3 洗涤
甩去孔内液体，用稀释好的洗涤液洗涤包被板，300μl/孔，振荡洗涤3次，拍干。

	1	2
3	4	5	6	7	8	9	10	11	12
A	P	S1	S2	S3	S4
B	P
C	N
D	N
E
F
G
H

(注：“P”为阳性血清对照；“N”为阴性血清对照；S1、S2、S3、S4 为待检血清样品)
4.4 二抗孵育
向各孔中加入兔抗牛IgG 酶标抗体，100μl/孔。将包被板置37℃下孵育1小时。
4.5 洗涤
方法同4.3。
4.6 显色
加入底物显色液，100μl/孔，置室温(15～25℃)下，避光孵育9分钟。
4.7 终止
加入终止液，50μl/孔，轻微震荡混合均匀。
4.8 读数
在加入终止液15分钟内，将包被板置于酶标仪中，用波长450nm(OD450)读数。
4.9 S/P值计算
按照以下计算公式，计算S/P值。

4.10 判定标准
4.10.1 试验结果有效的条件是：阳性血清对照OD450值均应≥0.8，阴性血清对照OD450 值均应＜0.1。
4.10.2 待检样品的S/P 值≥0.418时，判定为阳性；待检样品的S/P值＜0.418时，判定为阴性。
牛支原体抗体ELISA检测试剂盒【注意事项】
(1)所有试剂在2～8℃条件下保存。
(2)贮存时，所有的板条一定要用封口膜密封，防止潮气对包被板的损伤。
(3)不要使底物溶液接触强光和氧化物。取出后，不得再加回瓶中。
(4)仔细阅读说明书。
(5)不要使用过期的成分或者不同批次试剂混合使用。
(6)稀释10×洗液时，如发现存在结晶，可置37℃下加热使其溶解后再使用。
(7)注意加样和洗涤过程，以确保试验的准确度，不能用嘴吸液。
(8)被检血清发生腐败时勿用于检测。
(9)检验用器皿必须清洁，操作过程避免与金属类器物接触。
(10)在加样时，应使各孔的加样时间差别小于5 分钟，以保证各孔反应时间一致。
(11)操作过程中使用手套，终止液是硫酸，如接触，应用清水迅速冲洗接触部位。
【贮存与有效期】
2～8℃保存，有效期为9个月。