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- 2025年07月15日
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上海博湖
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57
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- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 年限：
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- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 器官来源：
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- 是否是肿瘤细胞：
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- 细胞形态：
上皮样/成纤维样/其它
- 免疫类型：
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- 物种来源：
人/小鼠/大鼠/其他
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- 组织来源：
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细胞描述
人卵巢上皮细胞培养试剂盒人卵巢上皮细胞分离自正常人卵巢组织。其中，卵巢上皮细胞主要功能：（1）上皮细胞能分泌激素，刺激卵细胞分化成熟。（2）细胞能分泌炎症介质，参与炎症反应。 虽然人卵巢组织机械韧性很强，但利用本公司试剂盒中提供的人卵巢组织分离体系来分离，EDTA/EGTA处理过的薄的人卵巢组织片能使得人卵巢组织中上皮细胞的一些功能特性发生改变，从而将上皮细胞分离开来。本试剂盒适用于分离培养新生儿或成年人的卵巢上皮细胞。本体系提供了最佳的组织分离条件，分离单个细胞的效率是已出版文献中所报道的5~6倍。此外，本体系还能保证所分离的细胞在培养基中具有很高的活性。利用的成纤维抑制体系，可以最大程度地降低所培养的人卵巢原代上皮细胞中成纤维细胞的含量。 人卵巢上皮细胞培养试剂盒适合于培养人的卵巢上皮细胞。本试剂盒包含： （1）OptiTDSTM人卵巢上皮细胞组织解离液（3×1ml） （2）人卵巢上皮细胞组织处理缓冲液（100ml） （3）FibrOutTM人卵巢上皮细胞成纤维抑制剂（1ml（500X）） （4）人卵巢上皮组织洗液(5 x 100 ml) （5）人卵巢上皮细胞生长因子（1ml500X）及血清（5x10ml） （6）人卵巢上皮细胞基础培养基(5 x 100ml) （7）人卵巢上皮组织预备液 (1 x 100 ml) （8）人卵巢上皮细胞培养试剂盒使用说明书
细胞传代：
人卵巢上皮细胞培养试剂盒1. 显微镜下观察细胞，神经干细胞悬浮成“神经球”生长，通常情况下，每两天换液一次，每四天传代一次。
2. 在生物安全柜或者超净台中，将培养瓶中的含有神经球的培养基转移到15ml离心管中。
3. 500rpm离心5分钟，收集神经干细胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶，在超净工作台中轻轻吹打10次，注意不要消化太久，消化的目的是缩小神经球的体积，不要消化能单个神经干细胞，那样会影响其生长速度。
5. 然后加入5ml培养基，吹打均匀后1000rpm 离心5分钟。
6. 离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:2-1:3的比例进行细胞传代培养。
细胞复苏：
1. 人卵巢上皮细胞培养试剂盒 取出冻存管后，投入37℃水浴中，震荡解冻2 min。
2. 酒精消毒管壁外侧后，将其转入超净台中，将管内细胞转移至离心管中，加入5 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基。
3. 将离心管离心（1000rpm，5 min）。
4. 弃去上清，再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培养基，转入培养瓶中培养。
细胞冻存：液氮冻存（冻存液：DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO）。
细胞运输：干冰运输（冻存管）/ 常温运输（T-25培养瓶）
细胞鉴定：神经干细胞采用nestin免疫荧光染色鉴定。左图是白光视野中的“神经球”形态，放大倍数为200x，右图为nestin染色后的荧光图片（绿色），放大倍数为200x。
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人卵巢上皮细胞培养试剂盒悬浮细胞的传代
悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮，因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞的损伤也较小。悬浮培养时不进行生长培养基的更换；而是每 2 到 3 天加料一次，直到细胞汇合。可以直接在培养瓶中稀释细胞，然后继续培养扩增，或者也可以从培养瓶中取出一部分细胞，将余下的细胞稀释到该细胞系适宜的接种密度。悬浮细胞传代后的延滞期一般比贴壁细胞短
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文献和实验【2,3】；此外，初始化疗后通常会由于铂类耐药而复发，因此建立更精准的卵巢癌模型对于深入理解疾病机理和个性化治疗是必不可少的。基于类器官技术的 OC 类器官就是可以模拟来源组织关键特征的体外模型，不仅能够再现患者体内肿瘤的特异性（包括表型特性和基因突变），并能够检测患者对药物的敏感性。 本篇文章基于STAR protocol【4】发表的文章，整理了病人组织来源的卵巢癌类器官的培养方案。 图 1. 病人组织来源的卵巢癌类器官培养方案【5】 细胞来源 活检样本或手术样本 培养基配方 取样培养
上皮细胞包括腺上皮细胞，是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分，又由于癌起源于上皮组织，故上皮细胞培养特别受到重视。但上皮细胞培养中常混杂有成纤维细胞，培养时生长速度往往超过上皮细胞，并难以纯化，同时上皮细胞难以在体外长期生存，因此纯化和延长生存时间是培养关键。体内上皮细胞生长在胶原构成的基膜，因此培养在有胶原的底物上可能利于生长，另外人或小鼠表皮细胞培养在以 3T3细胞为饲养层（用射线照射后）时，细胞易生长并可发生一定程度的分化现象。降低 PH、Ca2+含量和温度，向培养基中加入表皮
上皮细胞培养 1）表皮细胞培养 1．取材：取外科植皮或手术残余皮肤小块，以角化层薄者为佳，早产流产儿皮肤更好，切成0.5～1 平方厘米小块。 2．EDTA 处理：先置入0.02％EDTA 中室温置5 分钟。 3．冷消化：换入0.25％胰蛋白酶中，置4℃过夜。 4．分离：取出皮肤，用血管钳或镊子把表皮与真皮层分开。 5．温消化：取出表皮单独处理，用剪刀剪成更小的块后，置入新的0.25％胰蛋白酶中，37℃再消化30～60 分钟
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