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- 2025年07月16日
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- 品系：
详见说明书
- 细胞类型：
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- 供应商：
上海博湖
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51
- 英文名：
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- 生长状态：
贴壁/悬浮
- 年限：
详见说明书
- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 器官来源：
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- 是否是肿瘤细胞：
详见说明书
- 细胞形态：
上皮样/成纤维样/其它
- 免疫类型：
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- 物种来源：
人/小鼠/大鼠/其他
- 相关疾病：
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- 组织来源：
详见说明书
- 规格：
详见说明书
细胞描述
人角膜成纤维细胞产品描述：人角膜成纤维细胞分离自正常人角膜结缔组织，主要功能：（1）成纤维细胞是结缔组织中最常见的一种细胞。（2）可在角膜创伤后修复组织。公司提供的人角膜成纤维细胞细胞均来自新鲜组织，用于培养人角膜成纤维细胞细胞的组织采集于地方医院，组织的采集根据公司批准的方案进行。细胞的培养采用公司专利产品人角膜成纤维细胞细胞培养试剂盒(HumanEyesPrimaCell:NormalCornealFibroblastsCatNo.3-0540)来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞的污染，同时保证质量的稳定。在公司技术部标准的操作流程下，人角膜成纤维细胞细胞可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
发货：客户可根据自身科研项目的需要选择不同类型的细胞培养瓶和相应的细胞密度。公司提供的细胞有标准的鉴定流程，保证细胞的纯度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。发货的新鲜细胞还包含:1、发货的T25方瓶中装满50ml左右完全培养基；2、说明书及注意事项；3、公司技售后服务标准。
保存和应用：客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞，如是新鲜原代细胞，客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h，再进行后续的实验操作。如是冻存细胞，客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。该细胞只可用于科研，不得用于临床应用。
细胞传代：
人角膜成纤维细胞1. 显微镜下观察细胞，神经干细胞悬浮成“神经球”生长，通常情况下，每两天换液一次，每四天传代一次。
2. 在生物安全柜或者超净台中，将培养瓶中的含有神经球的培养基转移到15ml离心管中。
3. 500rpm离心5分钟，收集神经干细胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶，在超净工作台中轻轻吹打10次，注意不要消化太久，消化的目的是缩小神经球的体积，不要消化能单个神经干细胞，那样会影响其生长速度。
5. 然后加入5ml培养基，吹打均匀后1000rpm 离心5分钟。
6. 离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:2-1:3的比例进行细胞传代培养。
细胞复苏：
1. 人角膜成纤维细胞 取出冻存管后，投入37℃水浴中，震荡解冻2 min。
2. 酒精消毒管壁外侧后，将其转入超净台中，将管内细胞转移至离心管中，加入5 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基。
3. 将离心管离心（1000rpm，5 min）。
4. 弃去上清，再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培养基，转入培养瓶中培养。
细胞冻存：液氮冻存（冻存液：DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO）。
细胞运输：干冰运输（冻存管）/ 常温运输（T-25培养瓶）
细胞鉴定：神经干细胞采用nestin免疫荧光染色鉴定。左图是白光视野中的“神经球”形态，放大倍数为200x，右图为nestin染色后的荧光图片（绿色），放大倍数为200x。
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培美曲塞酸(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品Pemetrexed
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周效磺胺(标准品)质量规格：HPLC>98%,标准品sulphadoxine
人角膜成纤维细胞悬浮细胞的传代
悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮，因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞的损伤也较小。悬浮培养时不进行生长培养基的更换；而是每 2 到 3 天加料一次，直到细胞汇合。可以直接在培养瓶中稀释细胞，然后继续培养扩增，或者也可以从培养瓶中取出一部分细胞，将余下的细胞稀释到该细胞系适宜的接种密度。悬浮细胞传代后的延滞期一般比贴壁细胞短。
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文献和实验丁香园网友hyong915的观点为：成纤维细胞培养（一） 原代培养1、在手术室无菌条件下，切取新鲜的皮肤，增殖性瘢痕和瘢痕疙瘩组织，修除表皮和皮下组织，盐水反复冲洗后放入含PS的DMEM培养液内带回无菌工作间。2、把组织块置于培养皿内，Hank,s液漂洗三遍后吸净Hank,s液，眼科剪反复剪切组织块成0.5－1mm3大小。用弯头吸管吸取组织块接种于40ml培养方瓶瓶壁上，组织块间留约0.3－0.5cm的间距。3、 塞好瓶塞，放入37℃电热恒温培养箱内3.5小时使培养的组织小块微干涸
liupeizc 请问哪位高手知道成纤维细胞的生长周期啊，更确切的是血管外膜成纤维细胞生长周期，谢谢！ zhujoker 估计都没人做过，你如果需要观察其生物学功能，就自己做一次，也算原创了啊！ freecell 这里有： http://www.currentprotocols.com/protocol/cb0201 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意
构成纤维性结缔组织的重要成分。观察组织切片，可见这些细胞具有长而扁平的外形，常有不规则的突起。细胞质内含有线粒体、高尔基体、中心体、微脂肪粒等、其他无特殊的分化。细胞核呈椭圆形，有明显的核仁，细胞核染色性差。常与胶原纤维紧密相连，因与胶原纤维的形成有关故称为成纤维细胞。对动物细胞进行培养，不管细胞取自何处组织，因常常出现外表上和上述细胞非常相似的细胞，所以不论以后是否形成原来定义的胶原纤维，习惯上都称为成纤维细胞。但是在培养中所见的所谓成纤维细胞中也有不少会继续形成原来定义
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