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![SW579[SW 579; SW-579]，人甲状腺鳞癌细胞](https://img1.dxycdn.com/2018/1129/924/3314541739007920066-14.jpg!wh200)
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贴壁/悬浮
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常温运输/干冰运输
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上皮样/成纤维样/其它
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人/小鼠/大鼠/其他
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培养条件
hDPSCs, 人前磨牙牙髓干细胞DMEM培养基(添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；优质胎牛血清，10%
气相：空气，95%；二氧化碳，5%
温度：37摄氏度
细胞描述
hDPSCs, 人前磨牙牙髓干细胞细胞生长：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样或梭形
细胞数量：1×106个
细胞传代：1:2~1:6传代；2~3天换液1次
细胞特性： 牙髓干细胞是存在于牙髓组织中具有干细胞性质的未分化间充质细胞，具有多向分化潜能，可形成功能性成牙本质细胞和牙本质。
细胞纯度：93％
细胞活力：87％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
细胞检测：细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
细胞冻存：液氮冻存（基础培养基+10%DMSO+20%FBS）
细胞运输：干冰运输（1 Vial）或活细胞运输（T-25 flasks）
细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗
细胞传代：
hDPSCs, 人前磨牙牙髓干细胞1. 显微镜下观察细胞，神经干细胞悬浮成“神经球”生长，通常情况下，每两天换液一次，每四天传代一次。
2. 在生物安全柜或者超净台中，将培养瓶中的含有神经球的培养基转移到15ml离心管中。
3. 500rpm离心5分钟，收集神经干细胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶，在超净工作台中轻轻吹打10次，注意不要消化太久，消化的目的是缩小神经球的体积，不要消化能单个神经干细胞，那样会影响其生长速度。
5. 然后加入5ml培养基，吹打均匀后1000rpm 离心5分钟。
6. 离心后，去掉上清，用新鲜培养基重悬细胞，按照1:2-1:3的比例进行细胞传代培养。
细胞复苏：
1. hDPSCs, 人前磨牙牙髓干细胞 取出冻存管后，投入37℃水浴中，震荡解冻2 min。
2. 酒精消毒管壁外侧后，将其转入超净台中，将管内细胞转移至离心管中，加入5 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基。
3. 将离心管离心（1000rpm，5 min）。
4. 弃去上清，再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培养基，转入培养瓶中培养。
细胞冻存：液氮冻存（冻存液：DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO）。
细胞运输：干冰运输（冻存管）/ 常温运输（T-25培养瓶）
细胞鉴定：神经干细胞采用nestin免疫荧光染色鉴定。左图是白光视野中的“神经球”形态，放大倍数为200x，右图为nestin染色后的荧光图片（绿色），放大倍数为200x。
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hDPSCs, 人前磨牙牙髓干细胞悬浮细胞的传代
悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮，因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞的损伤也较小。悬浮培养时不进行生长培养基的更换；而是每 2 到 3 天加料一次，直到细胞汇合。可以直接在培养瓶中稀释细胞，然后继续培养扩增，或者也可以从培养瓶中取出一部分细胞，将余下的细胞稀释到该细胞系适宜的接种密度。悬浮细胞传代后的延滞期一般比贴壁细胞短。
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