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小鼠神经干细胞
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上皮样/成纤维样/其它
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人/小鼠/大鼠/其他
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公司的小鼠神经干细胞质量佳,发货速度快,售后有保证。可支持各大院校先票货
培养条件
小鼠神经干细胞培养基:DMEM/F12+1%N2+2%B27
气相:空气,95%;二氧化碳,5%
温度:37摄氏度
细胞描述
小鼠神经干细胞细胞描述:本公司培养出品的神经干细胞(NPC)取自12天C57小鼠胚胎的端脑,用DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培养基进行原代培养和传代。
细胞生长:神经干细胞悬浮成“神经球”生长。
细胞规格:1ml 冻存管 (1x106)或者 1个25cm2的培养瓶。
细胞活力:>90%
细胞代数:P2~P3
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
细胞传代:
小鼠神经干细胞1. 显微镜下观察细胞,神经干细胞悬浮成“神经球”生长,通常情况下,每两天换液一次,每四天传代一次。
2. 在生物安全柜或者超净台中,将培养瓶中的含有神经球的培养基转移到15ml离心管中。
3. 500rpm离心5分钟,收集神经干细胞。
4. 加入1ml 0.125%含有EDTA的胰酶,在超净工作台中轻轻吹打10次,注意不要消化太久,消化的目的是缩小神经球的体积,不要消化能单个神经干细胞,那样会影响其生长速度。
5. 然后加入5ml培养基,吹打均匀后1000rpm 离心5分钟。
6. 离心后,去掉上清,用新鲜培养基重悬细胞,按照1:2-1:3的比例进行细胞传代培养。
细胞复苏:
1.小鼠神经干细胞 取出冻存管后,投入37℃水浴中,震荡解冻2 min。
2. 酒精消毒管壁外侧后,将其转入超净台中,将管内细胞转移至离心管中,加入5 ml 37℃预热的DMEM/F12+10%FBS培养基。
3. 将离心管离心(1000rpm,5 min)。
4. 弃去上清,再加入2ml DMEM/F12+1%N2+2%B27完全培养基,转入培养瓶中培养。
细胞冻存:液氮冻存(冻存液:DMEM/F12+10%FBS+10%DMSO)。
细胞运输:干冰运输(冻存管)/ 常温运输(T-25培养瓶)
细胞鉴定:神经干细胞采用nestin免疫荧光染色鉴定。左图是白光视野中的“神经球”形态,放大倍数为200x,右图为nestin染色后的荧光图片(绿色),放大倍数为200x。
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乙酰胺琼脂 250 用于绿脓杆菌的选择性分离培养(GB标准)
十六烷三化铵琼脂 250 用于绿脓杆菌的选择性分离培养(GB标准)
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明胶培养基基础 250 生化试验培养基,用于细菌明胶液化试验(GB标准)
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TTC卵磷脂-吐温80-营养琼脂 250 用于化妆品中细菌总数测定(GB标准)
HC琼脂基础 250 用于化妆品中霉菌总数测定(Acumedia 方法)
改良LETHEEN琼脂基础 250 用于化妆品中微生物检测(Acumedia 方法)
液体硫乙醇酸盐培养基(不含琼脂) 250 用于混浊制品需氧菌无菌试验(GB标准)
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抗生素检定培养基2号(高PH) 250 用于林可霉素,克林霉素等效价测定
玫瑰红钠琼脂 250 用于霉菌、酵母菌计数
普通琼脂斜面培养基(PH8.0-8.2) 250 分离培养霍乱弧菌,麦迪霉素检定用
甘露醇高盐琼脂 250 用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养
抗生素检定培养基4号 250 用于两性霉素B等的效价测定
小鼠神经干细胞悬浮细胞的传代
悬浮细胞传代比贴壁细胞传代稍微简单一些。由于细胞已经在生长培养基中悬浮,因此无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离,整个过程较为迅速,对细胞的损伤也较小。悬浮培养时不进行生长培养基的更换;而是每 2 到 3 天加料一次,直到细胞汇合。可以直接在培养瓶中稀释细胞,然后继续培养扩增,或者也可以从培养瓶中取出一部分细胞,将余下的细胞稀释到该细胞系适宜的接种密度。悬浮细胞传代后的延滞期一般比贴壁细胞短。
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