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| L910 | 超滤水,细胞培养级 | 500 mL |
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文献和实验到了细胞上清液时,依次离心去除细胞、细胞碎片后进行存储;通过超滤方法浓缩上清液体积,提高外泌体浓度;最后通过超离或者试剂盒的方法提取外泌体。 以上的方法针对制备科研级别的外泌体质量会大有提升,如果要针对大规模(几升以上)的则需要结合其他的方法来操作。 文章图文来源:宇玫博生物
第一步细胞培养:外泌体来自于细胞,必须先从源头抓起,高质量的细胞及上清液产出高质量的外泌体。 收集上清的细胞培养原则:在细胞健康正常生长的前提下,尽可能的减少血清外泌体或是不使用血清。 培养条件 优点 缺点 1 含血清的完全培养基 ✘ 血清中含有大量异源外泌体 2 含去外泌体血清的培养基 ✔ 营养相对丰富 去外泌体血清难以做到 100% 的去除的,因此即使 1% 的血清外泌体残留也带来大量的异源外泌体 3 基础培养
在对水施加一定的压力后,高分子物质胶体物质就由膜所阻止,而水和低分子物质透过滤膜的过程叫超滤。 一、超滤的基本原理 一般认为超滤是一种筛孔分离过程主要用来截留分子量高于500的物质。在静压差的作用下,原料液中溶剂和小分子的溶质粒子从高压的料液侧透过膜到低压侧,通常称为滤出液或透过液;而大分子的溶质粒子组分被膜所阻截,使它们在滤剩液(或称浓缩液)中浓度增大。按照这种分离机理,超滤膜具有选择性的主要原因是形成了具有一定大小和形状的孔,而聚合物质的化学性质对膜的分离特性影响不大。因此,可以用细孔模型
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