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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
41
- 英文名:
5次
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海抚生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
5次
1. 根据要保存的各样本的体积,计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml RNAwait);离心收集2×106细胞RNAwait的用量是1ml。
2. 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入,组织中间部位的RNA不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入RNAwait。
4. 保存时先将样本浸入RNAwait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使RNAwait完全渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(RNAwait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从RNAwait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响RNA的质量。
海量 PCR 片段纯化试剂盒5次说明书注意事项:
1. 组织和细胞取材速度要快,在获取后应当尽快浸入RNAwait,以防止RNA降解。
2. 冰冻组织不能用RNAwait保存,因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3. 保存样品的RNA提取:样本从-20℃或-80℃冰箱取出后,复苏到室温后,取出组织块,再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞,去除RNAwait,再用于提取RNA。后继的处理(如组织匀浆)可以在室温下进行,不必在液氮中操作,RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。
海量 PCR 片段纯化试剂盒5次说明书实验要点:
1.CTAB 溶液在低于15℃时会析出沉淀,因此在将其加入冷冻的植物材料中之前必须预热。
2.在最适条件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纤维状,很容易一下子就从溶液中钩出。不过,某些植物种的DNA 沉淀中可能含有杂质,特别是多糖,使DNA 沉淀呈絮状或胶状,这种情况下可能需要稍事离心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。
3.饱和酚虽然可有效地使蛋白质变性,但酚不能完全抑制RNA 酶的活性,而且酚可以溶解含poLy(A)的mRNA。如果用的混合液,可减轻这两种现象,同时可加入适量的作用是消泡,并使蛋白质层紧密,使水相和有机相分层较好。 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS 的DH5α菌种接种在LB 固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24 小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB 液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12 小时至对数生长后期。小量提取法对于从大量转化子中制备少量部分纯化的质粒DNA 十分有用。这些方法共同特点是简便、快速,能同时处理大量试样,所得DNA 有一定纯度,可满足限制酶切割、电泳分析的需要。
海量 PCR 片段纯化试剂盒5次说明书详细介绍:

海量 PCR 片段纯化试剂盒5次说明书的相关产品:
Rnase&Dnase awayRNase&DNase清除剂500克BR,0.3-3.0u/mg
Rnase T1核糖核酶T1100克BR,10u/mg
RNASERNA酶5克BR,35u/mg
RNA-Na核盐25毫克植物细胞培养级,
RNA核100毫克BR,
Rink-Amide resinRink-Amide树脂25克BR
Rink Amide AM resinRink Amide AM树脂25克BR
Rifampicin利发霉素5克BR,20u/mg
Ribostamycin Sulfate salt威斯塔霉素1克BR,<62.5 μg/ml
RiboRuler Low range RNA Ladder低范围RNA Ladder25克BR
RiboRuler High range RNA Ladder高范围RNA Ladder100克BR,0.4u/mg,小麦,粉末
Ribonulease H核糖核酶H25克生物技术级,400u/mg
Ribavirin1-β-D-核糖基-1H-1,2,4,-三唑-3-羧酰100克BR,97%
Rhodizonic acid sodium salt玫棕100毫克试剂级,
Rhodanine银试剂5克AR
海量 PCR 片段纯化试剂盒5次说明书氨蝶呤(标准品) 质量规格:>98%,BR 1-Beta-D-Arabinofuranosylcytosine HCl
氨蝶呤 质量规格:HPLC>99%,标准品 1-Beta-D-Arabinofuranosylcytosine HCl
颊肽 质量规格:>98%,BR Manidipine Dihydrochlorid
加替沙星(标准品) 质量规格:HPLC≥98,标准品 Manidipine Dihydrochlorid
加替沙星 质量规格:>97%,BR Stanolone/Androstanolone
加拿大香脂 质量规格:>97%,BR Doramectin
加兰他敏β-D-葡萄糖苷酸 质量规格:>97%,BR 3,3',5'-Triiodo-L-thyronine
加兰他敏N氧化物 质量规格:HPLC≥98,标准品 Corylifol A
加兰他敏(标准品) 质量规格:>98%,BR Bromfenac sodium
加拉碘铵(>98%,BR) 质量规格:HPLC≥99,标准品 Bromfenac sodium
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文献和实验过的 DNA 聚合酶增强了与模板的亲和度,其灵敏度更高,因而所需的模板量少。过低的模板量会减少 PCR 的产量,过高的模板量可能造成非特异性扩增,所以 DNA 模板量的优化尤为重要。 除了 gDNA、cDNA 和质粒 DNA,PCR 产物也可作为模板以获得更高的产量。但 PCR 产物中存在的残余反应组分(如引物、dNTP、盐和副产物)可能会影响下一次的 PCR 反应。所以推荐在下一次 PCR 前使用 PCR 产物纯化试剂盒将 PCR 产物先进行纯化。 【DNA 聚合酶】 DNA 聚合酶是PCR扩增中最关键
一、实验原理 聚合酶链式反应(PCR)是模拟体内DNA复制条件在体外酶促合成特异DNA片段的循环反应,可使目的DNA片段得以迅速扩增。其主要步骤是:将待扩增的模板DNA置于高温(约93℃~95℃)下使之变性解链;人工合成的两个寡核苷酸引物在低温(约50℃~70℃)下分别与目的DNA片段两侧的互补序列复性结合;引物在DNA聚合酶作用(约70℃~75℃)下沿模板按5’→3’方向延伸,合成目的DNA片段的新互补链。如此经过n个周期,理论上扩增2n倍,一般PCR经30~40周期后可获得百万
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