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- JC10514
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- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
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大量
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 保存条件：
-20℃冻存
- 规格：
120T
产品简介：
总蛋白(Total Protein，TP)由白蛋白和球蛋白组成。对于生物体液(血清、尿液、脑脊液)中总蛋白质含量的测定，一般要基于如下两个假设：1、所有蛋白质分子由纯多肽组成，含氮量的质量百分比为16%；2、体液中含有数百个蛋白质分子，每个分子对测定反应都具有非常相似的特性。目前常用的方法有：双缩脲法、紫外分光光度法、染料结合法、凯氏定氮法、沉淀法等。总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)多用于人或动物血清、血浆、组织等样本中的总蛋白含量测定。双缩脲反应的原理是在呈蓝色的碱性硫酸铜溶液存在的情况下，铜离子与肽键形成有色螯合的铜复合物，呈紫色，所产生的颜色密度与参与反应肽键数成比例。可通过比色法分析浓度，在紫外可见光谱中的波长为540nm。双缩脲法测定蛋白浓度兼容性亦很，不受大部分样本中其他成分的影响，但易受铜离子螯合剂影响。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
总蛋白检测试剂盒(双缩脲比色法)注意事项：
1、 蛋白标准粉末溶解于蛋白标准配制液后，即获得蛋白标准原液，该原液中含有防腐剂，不影响后续检测，该蛋白标准原液-20℃长期保存。
2、 待测蛋白和蛋白标准加入双缩脲试剂后，如果发现检测效果不佳，可以室温放置1h或60℃放置15min，颜色会随着时间的延长不断加深。
3、 测定标准曲线时发现随着标准品浓度的增加吸光度或颜色没有明显变化，可能的原因是样品中含有铜离子螯合剂。
4、 如果没分光光度计，也可以使用酶标仪测定。使用酶标仪测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著增加。
5、 检测中发现所有孔都呈暗紫色，可能原因是样品含有还原剂，应适当透析或稀释样品。
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文献和实验一、原理 蛋白质分子中的肽键在碱性条件下能与二价铜离子作用生成紫红色的络合物，产生的颜色强度在一定范围内与蛋白质的含量成正比，但双缩脲反应并非蛋白质特有的颜色反应，分子中含二个以上肽键者有此反应。 二、双缩脲 试剂 未失结晶水的硫酸铜（CuSO 4· 5H 2 O）3.0g溶于500ml新鲜制备的 蒸馏 水或刚煮沸冷却的去离子水中，加酒石酸钾钠（NaKC
物质浓度。 两点终点法常应用于双试剂的测定项目中，多数第一试剂通常只含缓冲液等成分，它与样本一般不起特异性反应;因此在第二试剂加入前，选择一个测光点作为第一读数点，此时的吸光度相当于样品空白。加入第二试剂后待测物质起反应，并经过一定时间反应到达平衡点，此时选择第二个读数点，两读数点吸光度之差用于计算待测物质浓度。 两点法能有效消除样品溶血、黄疸、脂浊等造成的光吸收干扰。如：酶法测定葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、尿酸、肌酐，以及化学法测定总蛋白、总胆红素、直接胆红素、钙、磷、镁、铁等;并且都能在加入
1、凯氏定氮法仍然是建立各个具体方法时采用的参考标准方法。2、双缩脲比色法是目前首先推荐的蛋白质定量方法。方法操作简便，虽然双缩脲试剂有大同不异。其中酒石酸钾纳可以稳定在碱性溶液中的铜离子，含有碘化物作为抗氧化剂。双缩脲反应生成的复合物其吸收峰为540nm。可采用公认的标准牛血清白蛋白作为标准品，经精确称量，必要时用凯氏定氮法标定。各地质控中心提供的混合标准血清可作为第二参考，血清用量100μl，在10-120g/L浓度范围内呈良好线性关系，批内CV值3、基于蛋白分子中含有酪氨酸和色氨酸而使
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