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上海机纯实业有限公司
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100T
自噬(autophagy)是细胞受到刺激后吞噬自身的细胞质或细胞器,终将吞食物在溶酶体内降解的过程,自噬体(autophagosome)为双层膜包被的圆形或椭圆形结构,内含细胞质、长寿蛋白质和异常蛋白聚集物,损伤或多余细胞器如线粒体、粗面内质网和微体、病毒和细菌等。单丹磺酰尸胺(Dansylcadaverine,MDC )是一种荧光色素,是嗜酸性染色剂,通常被用于检测自噬体形成的特异性标记染色剂,其检测激发滤光片波长355nm。阻断滤光片波长512nm。细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法),适用于培养细胞的自噬染色,又称为MDC染色液,可与EB合用双染。
细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法)注意事项:
MDC Stain和EB,试剂有一定毒性,请小心操作。
橙染色常与EB染色合用,可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
操作过程中应注意减少试剂暴露于强光下的时间。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
Use of siRNA to Study the Function of MDC1 in DNA Damage Responses
Small interfering RNA (siRNA) technology has emerged as a powerful genetic tool to investigate gene function in mammalian cells. Here we use siRNA to study a mediator of DNA damage-checkpoint protein 1 (MDC1), previously known as Kiaa0170
在收集到生物材料之后,最好能即可进行RNA制备工作。若需暂时储存,则应以液氮将生物材料急速冷冻后,储存于-80℃冷冻柜。在制备RNA时,将储存于冷冻柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破细胞,不可以先行解冻,以避免RNase的作用。1. 提取组织RNA时,每50~100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解:提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5~106个细胞加1ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈震荡以裂解细胞;2. 将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在试问
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