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- 2025年11月11日
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- 文献和实验
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-20℃
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大量
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 规格：
1ml
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液即SDS-PAGE Sample Loading Buffer(2×)，是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的2倍浓缩的蛋白上样缓冲液。
操作步骤(仅供参考)：
在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE蛋白加样缓冲液(2×)。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
取适量的蛋白样品和SDS-PAGE Sample Loading Buffer(2×)等量混合，充分混匀。
100℃或沸水浴加热5～10min，以充分变性蛋白。
冷却到室温后，直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
通常电泳至蓝色染料到达PAGE胶的底部附近即可停止。
注意事项：
SDS-PAGE Sample Loading Buffer(2×)中含少量DTT，有轻微刺激性气味，但不含由毒物质β-巯基乙醇。
SDS-PAGE Sample Loading Buffer(2×)必须完全溶解后再使用。
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文献和实验5×TBE缓冲液 Tris 硼酸 0.5M EDTA （pH8.0） 去离子水 54g 27.5g 20ml 定容至1L 室温保存 50×TAE缓冲液 Tris 冰乙酸 0.5M EDTA （pH
2×HEPES缓冲盐溶液 【配制方法】 用总量为90ml的蒸馏水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2PO4?2H2O、0.2g葡聚糖和1gHEPES，用0.5mol/l NaOH调节 pH值至7.05，再用蒸馏水定容至100ml。用0.22μm滤器过滤除菌，分装成5ml小份，贮存于-20
或 4℃过夜以捕获免疫沉淀复合物。 离心（3000 rpm，5 min）收集 Agarose 珠子，弃掉上清，用 800 µL-1000µL 预冷的 PBS 缓冲液洗涤珠子 3 次。（小心吸取上清，避免触碰底部珠子） 收集沉淀，加 60 µL 2×SDS 蛋白上样缓冲液中重悬沉淀，轻混均匀后煮沸 5 min，12000 rpm 离心 10 min。 将上清转移至一新离心管，进行 Western 检测。
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