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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃
- 库存:
大量
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
100ml
操作步骤(仅供参考):
在1.5ml培养物中加入适量LB冷冻缓冲液。
充分混匀,低温保存。
菌种复苏时,用灭菌接种环刮拭冻结的培养物表面,立即接种于LB琼脂平板表面,37度培养过夜。
注意事项:
注意无菌操作,尽量避免污染。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验15 min,然后在 65 ℃ 水浴中使胶融化;(2)加入等倍体积 TE-饱和酚,剧烈振荡 30 秒钟,然后-70 ℃ 冷冻 15 min;(3)室温融化后,12,000 rpm 离心 5 min,将上层水相移至另一离心管中,用 2.5 倍体积乙醇和 0.1 倍体积 3 mol/L NaAc(pH5.2) 沉淀 DNA 片段,离心后的沉淀用 75% 乙醇漂洗一次,室温干燥 DNA,用双蒸水或 TE 缓冲液溶解 DNA 后,-20 ℃ 保存备用。2. 低熔点琼脂糖法:(1)在 UV 灯下,用手
的浓度。 4.抽提的质粒 DNA 电泳时怎么出现切口、断裂或降解现象? (1)使用的是收集后冷冻保藏的细菌。解决方法:使用新鲜培养的细菌。 (2)宿主菌富含核酸内切酶。解决方法:增加一步 Rinse A 洗涤步骤以彻底去除残留的核酸内切酶。或者将质粒 DNA 进行乙醇沉淀。 (3)质粒 DNA 在 Solution II 中暴露过久,易造成质粒 DNA 的切口断裂。裂解步骤控制在 5 分钟内完成。 (4)培养的细菌被杂菌污染。解决方法:重新挑取单菌落培养细菌。 5.抽提的质粒 DNA 电泳时怎么出现基因
、操作步骤1、细菌繁殖LB培养基,2 ml/20ml,37℃,200rpm,摇一摇,过夜2、离心10 min,5000 rpm, 4℃;弃上淸液3、沉淀(菌体细胞)预冷的TES缓冲液洗涤,离心10 min,5000 rpm, 4℃加入预冷的1 ml Solution I,冰浴,10 min4、重新悬浮,加入150 ul溶菌酶母液,室温放置5 min5、加入1.2 ml Solution II, 冰浴,5 min6、加入0.9 ml预冷乙酸钾,混匀,离心10 min,12000 rpm, 4℃7、加入
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