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上海机纯实业有限公司
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1L
平衡盐溶液(Balanced Salt Solution,BSS)与细胞生长状态下的pH值、渗透压等环境状态一致,具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用,可满足体外实验中细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。主要由无机离子组成,有时含有碳酸氢钠、葡萄糖、酚红等,如有必要还可以加入HEPES以维持渗透压的平衡。BBS配方常有改动,Hank's BBS有不含钙镁或酚红的,也有含钙镁含酚红的等, Dulbecco's PBS有不含钙镁或含钙镁的等。HBSS、EBSS、PBS等都是与较弱的磷酸盐缓冲液相关的盐溶液。常见的平衡盐溶液有Eargle's液、Hank's液、磷酸盐缓冲溶液(PBS)等。
操作步骤(仅供参考):
如需无菌,可进行高压灭菌或过滤除菌。
注意事项:
在进行细胞培养过程中细胞的洗涤时,应注意无菌操作,避免被微生物污染。
磷酸缓冲盐粉剂(10×PBS,无钙镁)由于不含有钙离子,不易产生沉淀,出现该种情况后,一般置于温浴至沉淀溶解即可, 如果产生较多沉淀应弃用。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验相关专题 因为钙离子和镁离子会影响胰酶的消化能力,导致胰酶消化能力下降,培养细胞时,消化的细胞数量有限,加上细胞的密度依赖性,所以细胞培养时最好使用不含有钙镁离子的PBS 缓冲液。
的冲洗液、冻存液和培养液。 (2)D-PBS配方:氯化钠8 g,氯化钾0.2 g,磷酸氢二钠1.15 g,磷酸二氢钾0.2 g,氯化钙0.1 g,含6个结晶水的氯化镁0.1 g溶于1 L ddH2O中。 (3)以上配方为含有钙镁离子的D-PBS,如不加氯化钙和氯化镁,即为无钙镁的D-PBS。 (4)在以上配方的基础上,还可以加入葡萄糖、丙酮酸钠等,以更利于培养物的生长。 D-PBS是杜氏磷酸缓冲液,也是一种磷酸盐缓冲液,与常规磷酸缓冲液最大的不同
悬液(4步骤处理过的细胞悬液)于载玻片上,并用盖玻片盖上细胞。在荧光显微镜下用双色滤光片观察。 B.贴壁细胞 一、流式细胞仪检测 按照实验方案进行凋亡诱导,将培养基吸出转移至干净离心管内(待用),用无钙、镁离子的PBS清洗培养瓶细胞一次。 培养瓶中加入适量的胰酶消化细胞,室温孵育至轻轻吹打可使贴壁细胞脱落,吸除胰酶消化液,避免胰酶消化过度。 注意:对于贴壁细胞,胰酶消化步骤很关键。胰酶消化时间如果过短,细胞需要用力吹打才能脱落,容易造成细胞膜的损伤,从而导致细胞坏死的假阳性;消化时间如果过长,同样
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