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动态活细胞的超分辨影像应用, 是科研的一大挑战. 必须在同一时间点, 同时考虑许多成像因素, 因为 :
- 可否取得最高的解析 ? 2D / 3D / 4D ?
- 活细胞会移动
- 活细胞样本会有厚度的问题, 有透光性的问题.
- 活细胞会因为光剂量过高而致死, 产生光毒害.
- 活细胞的染剂容易产生光漂白
- 活细胞的应用, 会希望使用 2 种以上的多色荧光蛋白.
- 长时间纪录, 样本是否会飘移失焦 ?
- 如何长时间的有效纪录 ?
Abberior 来自科研领域, 深知科研人员所需要的是什么 ? 也知道该如何去解决 ! Abberior 再度突破光学影像技术的障碍, 推出了全球独一的活细胞超分辨成像技术与系统 – LIVE-CELL STED.
实验已证实, 唯有 LIVE-CELL STED 才可有效的落实动态活细胞的超分辨成像应用. 截至目前为止, 其他技术都无法有效的实现活细胞超分辨成像 !

Live-cell Confocal and Live-cell STED images of SiR tubulin labelled mammalian cells; ROI, in total 1.5 hours ( 100 frames )

Python/MATLAB overnight control: 自动控制长时间影像撷取. 把复杂的控制单元整合在一起.

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文献和实验施一公团队突破性进展再登 Science!以超高分辨率解析核孔复合物的结构细节
ring from the Xenopus laevis nuclear pore complex 的研究论文,展示了非洲爪蟾 NPC 内环 (IR) 亚基的单粒子冷冻电子显微镜结构,平均分辨率为 4.2 Å,揭示了脊椎动物 NPC IR 亚基组装的分子基础。 图片来源:Cell Research 冷冻电镜作为引爆生物学进入新时代的工具,在结构生物学领域发展中立下了汗马功劳,让我们继续翘首以盼,等待更多的超大分子量和高分辨率的蛋白结构诞生,见证实验结构生物学的革命!
部位的纳米尺度区域以减少荧光光点的衍射面积,通过扫描记录即可获取整个样品的完整图像。STED 显微镜的横向分辨率可达 20~70nm,凭借超高的分辨率,STED 很快被应用于生物细胞研究并取得一系列重要的新发现。 但是,由于 STED 本身属于点扫描成像技术,为了提升成像速度,STED 通常需要高的激发强度(~107W/cm2)来记录足够的光子以换取时间分辨率,所导致的光毒性和光漂白限制了 STED 在活细胞成像中的应用。 结构光照明显微术 另一种典型的基于点扩散函数调制的超分辨技术是 SIM
Application of Real-Time STED Imaging to Synaptic Vesicle Motion
intensities (as usually higher intensities are needed for live imaging at adequate frequencies compared to fixed-cell imaging). In this chapter, we review recent progress made with stimulated emission depletion (STED) microscopy in imaging single synaptic
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