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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
现货
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 检测范围:
详见说明书
- 检测方法:
酶联免疫
- 应用:
科研实验
- 适应物种:
小鼠
- 标记物:
详询
- 样本:
详见说明书
- 规格:
48T/96T
ELISA原理及流程
小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)检测试剂盒(双抗夹心法)

ELISA-详细步骤

ELISA 样本的处理
ELISA 检测的目的是为实验提供准确可靠的定量分析的实验依据。为了保证实验数据 的可靠性, 在实验过程中必须坚持全面和全程的质量控制。 并且在收集标本前都必须有一 个完整的计划。
注意事项:
1)每个标本量收集体积=100ul ×检测种类,如要做复孔,标本量收集体积=100ul ×检测 种类×2 。
2)对于作某一个具体指标来说,最好先用一系列稀释度作一批标本测定,得出对实验有意 义的一个稀释度(即测定剂量反应曲线),然后用一个最适稀释度测定即可。
3)收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存 在 4 ℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃ 条件下保存。避免反复冻融。标本 2-8 ℃可保存 48 小时, -20 ℃可保存 1 个月。-70℃ 可保存 6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
- 血清标本采集时,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质, 以 HRP 为标记的 ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。
- 为了保证尿液检测结果的准确性,必须正确收集尿液标本和保存。盛尿容器要清洁干燥。 最好使用一次性的容器(如塑料尿杯),避免因用药并清洗不干净而造成的污染,影响 检测结果。尿液标本必须新鲜,留取后,应及时检测或保存,以免细菌繁殖。因在室温 (尤其是夏季)中久置后尿中的磷酸盐等可析出结晶而干扰检测。
- 标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性 HRP,也会产生假阳性 反应。保存过久可发生聚合在 ELISA 中可使本底加深。
- 冻结标本融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分轻缓混匀,避免气泡,可上下颠 倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。
- 混浊或有沉淀的标本应先离心或过滤,澄清后再检测。
- 反复冻融会使蛋白效价降低,所以待测标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。也 可加入适当防腐剂。
- 如果您在实验中遇到任何特殊问题,敬请咨询我司技术。
标本类型
ELISA 常见的标本一般包括:
液体类标本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
标本的保存
1)一般说来,在 5 天内测定的标本可放置于 4℃,超过一周测定的需低温冻存。
2)对收集后当天进行检测的标本,储存在 4 ℃ 备用,如有特殊原因需要周期收集标本, 将标本及时分装后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 条件下保存。避免反复冻融。
3)标本 2 -8 ℃ 可保存 48 小时, -20 ℃ 可保存 1 个月。 -70 度可保存 6 个月。部 分标本也可加入适当防腐剂,激素类标本需添加抑肽酶。
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文献和实验人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL) 酶联免疫 分析 试剂 盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆,尿液及相关液体样本中 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL) 含量。 实验原理 : 本试剂盒应用双抗体夹心法测定 标本 中 人 中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL) 水平。用纯化的 人 NGAL 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 人中性粒细胞
人中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin, NGAL)是Kjeldsen等人于1993年在中性粒细胞的特殊颗粒中首先发现的。以往的研究表明NGAL与炎症、胚胎发育、免疫应答、趋化作用、信号转导以及多种肿瘤的发生与发展等过程密切相关。NGAL在乳腺癌、食管癌、结直肠癌、胃癌、慢性粒细胞性白血病等细胞系中均过表达,并在癌细胞的浸润与不良分化中发挥重要的作用。进一步研究证实,NGAL是存在于中性粒细胞和某些上皮
NGAL(中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白)作为肾损伤的标志物最近成为热点。但是,像许多其他内源性生物标志物分子一样,它不是由一种细胞类型产生的,不同组织中的不同病理都会引起反应。应考虑到不同病人的并存条件解析结果,对这个灵敏的生物标志物做出最佳利用。 从我在CLI的简短介绍文章之后,关于NGAL作为肾损伤早期标志物的性能的研究没有停止。关于NGAL的论文出现速度是每周超过2篇,主要强调的是其肾脏作用。这并不是说这个有趣的分子的其他方面被忽略了
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