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Protein Gel Mini-Extraction Kit
一年
北京百奥莱博科技有限公司
常温
50次
特别提示:包括蛋白胶微量回收试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
成分 | 规格 |
溶液A | 10ml |
溶液B | 50ml |
微型离心管专用研磨杵 | 50只 |
组份 | 50次 |
Blocking Buffer |
500ml |
Antibody Pretreat Solution(HRP/Rabbit) | 5×1ml |
Dilution Buffer | 500ml |
Wash Buffer(10×) | 500ml |
问题 | 可能原因 | 解决方案 |
信号太弱或者 看不到条带 |
蛋白上样量太少 | 进行SDS-PAGE电泳时加大上样量。 |
蛋白转膜效率太低 | 优化转膜时间或者电流,确保转膜时膜与胶之间没有气泡。 | |
一抗亲和力较低 | 增加膜在溶液中的孵育时间或者增加抗 体浓度可以增加信号 |
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一抗亲和力较低 | 对于低亲和力抗体来说,减少洗膜时间可以增加信号。由每次10 分钟,减少到每次5分钟可以增加信号。 | |
背景偏高 | 一抗使用过量 | 减少一抗的使用量。 |
一抗有非特异性结合或者 与封闭试剂有交叉反应 |
使用和二抗来源一致的血清或者无IgG的BSA。 | |
洗膜时间太短 | 增加洗涤的步骤可以进一步的降低背景。 | |
曝光显影时间过长 | 减少曝光时间。如果信号和背景都高,可以等待一段时间 ,等背景信号减弱后,再进行曝光。 |
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容器或者试剂被污染 | 每次洗涤的时候使用清洁的容器。带手套,使用清洁的镊子处理膜。 |
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