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- 天根
- NG219
- 2026年01月01日
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TIANSeq HiFi Amplification Mix 是一种新型高保真 PCR 扩增预混液，可用于 DNA 的高保真快速扩增，如基因表达克隆、基因定点突变、基因组点突变的分析（SNP）等；更可用于高通量测序中，如高保真基因组 DNA 文库的富集。
产品特点：
- 扩增快速：延伸速度可达 10-15 sec/kb。
- 延伸力强：可扩增长至 20 kb 的 DNA 片段。
- 特异性好：具有热启动功能，可用于多重 PCR。
- 灵敏度高：模板用量可低至 10 pg。
- 偏好性低：针对不同 GC 含量的模板都有均衡的扩增效果。
- 应用广泛：可用于高通量测序文库的 PCR 扩增和其他 PCR 相关的克隆和检测。
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实验例：
 使用分子信标法（Ma et al., Anal Biochem, 2006）检测不同高保真酶的热启动性。所有产品均宣传其具有热启动能力，但检测结果表明这些产品中只有 UltraHiFi 在 95 度时才被激活，其余产品在 40-50 度时均有链退火和延伸能力。 |
不同酶的保真性 使用 Lac I 法检测酶的保真性。TIANGEN UltraHiFi 的保真性是普通 Taq 酶的 50 倍以上。 |
使用 UltraHiFi 酶 (A)、国外 TK 公司 (B) 和 N 公司 (C) 高保真酶、国内 V 公司 (D) 和 TR 公司 (E) 高保真酶分别扩增不同来源、不同长度的片段。结果显示，UltraHiFi 在扩增能力、特异性、普适性、长片段扩增效率方面的综合性能表现最优。 M：TIANGEN D15000 Marker 1：人类基因组 DNA 模板 (750 bp) 2：人类基因组 DNA 模板 (1 kb) 3：人类基因组 DNA 模板 (2 kb) 4：人类基因组 DNA 模板 (4 kb) 5：人类基因组 DNA 模板 (6 kb) 6：人类基因组 DNA 模板 (1915 bp，GC 70.4%) 7：大鼠基因组 DNA 模板 (2 kb) 8：水稻基因组 DNA 模板 (2 kb) 9：小麦基因组 DNA 模板 (2 kb) 10：大肠杆菌基因组 DNA 模板 (2 kb) 11：大鼠基因组 DNA 模板 (8 kb) 12：大鼠基因组 DNA 模板 (8 kb) 13：大鼠基因组 DNA 模板 (8 kb) 14：Lamda DNA 模板 (15 kb) |
 使用 UltraHiFi 酶用不同延伸时间扩增不同长度的片段。结果显示，对于小于 4 kb 的片段，延伸速度可达 5 sec/kb，长片段可适当延长延伸时间，使用 30 sec/kb 的时间可扩增 15 kb 以上片段。 M：TIANGEN D15000 Marker |
 使用 UltraHiFi 酶扩增不同起始浓度和长度的片段，UltraHiFi 至少能够识别 1 ng 基因组 DNA 模板和 1 pg 的质粒模板。 A：M：TIANGEN 1 kb DNA ladder。1-7：人类基因组 DNA 模板。加入量分别为 1000 ng，500 ng，100 ng，50 ng，10 ng，5 ng，1 ng。 B：M：TIANGEN Marker III。1-6：4.5 kb 质粒 DNA 模板。加入量分别为 100 ng，10 ng，1 ng，100 pg，10 pg，1 pg。 |
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文献和实验DNA Amplification Fingerprinting
Method A DAF protocol usually involves two major steps. DNA amplification and the separation and visualization of amplification products Materials for PCR Requirements : PCR , dNTP mix, Taq enzyme
Amplification and Labelling with Cy dyes
for the following conditions: 2min. 94℃ 2min. 8℃ *1st round,add reaction mix 1; 2nd round,add reaction mix 2 8min.ramp to 37℃ 8min. 37℃ repeat cycle once Dilute products with 35ml 1XTE. 2.First round of PCR amplification with fixed sequence primer Prepare
DNA Amplification Fingerprinting Protocol
PCR amplification The PCR reaction mix (10 µL) contains template DNA (2 ng/µL), primer (0.3 µM), Taq DNA polymerase, Stoffel Fragment (Perkin Elmer; 5 U), Mg++ (2.5 mM), buffer (1X) and overlaid with a drop of mineral oil
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