脱氧核糖核酸酶 I 来源于牛胰腺

属性

生物来源

bovine pancreas

质量水平

300

形式

lyophilized powder

比活

≥400 Kunitz units/mg protein

分子量

~31 kDa

组成

Protein, ≥85%

技术

DNA extraction: suitable

溶解性

0.15 M NaCl: soluble 5.0 mg/mL, hazy

适用性

suitable for molecular biology

应用

diagnostic assay manufacturing
diagnostic assay manufacturing

说明

一般描述

DNase I（脱氧核糖核酸酶I）是一种从牛胰腺分离的核酸内切酶。

· 我们的DNase I可将双链和单链DNA酶解成寡核苷酸和单核苷酸。

· 牛胰腺DNase存在四种异构酶A, B, C和D，均具有不同的等电点：5.22, 4.96, 5.06及4.78.3。主要形式为A，其次为B和C，D所占的比例最小。

· DNase I结构类似于核酸外切酶III。其中包括两个中央β折叠。每个β折叠由六个β-链组成。这种复杂的β折叠被大量环形和螺旋形区域包围。该酶结构类似于核酸外切酶III。

应用

· 从原代细胞分离液中去除DNA，在降低粘度的同时提高产量：

· 将标记碱基掺入DNA：DNA缺口

· 放射性标记

· 生物工艺应用：DNA去除

· 在RT-PCR前从RNA制剂中去除基因组DNA

· 体外转录

· 缺口平移

· DNase足迹

· 肌动蛋白调控胞内肌动蛋白聚合和细胞凋亡

· 蛋白质与核酸紫外线交联

· DNase参与调控胞内肌动蛋白聚合，同时参与细胞凋亡过程 

用于从蛋白质样品中除去 DNA。

生化/生理作用

DNase I是一种内切核酸酶，可作用于与嘧啶相邻的磷酸二酯键以产生具有末端5′-磷酸的聚核苷酸。当Mg²⁺存在时，DNAse I可独立切割DNA的每条链且切割位点是随机的。当Mn²⁺存在时，两条DNA链都几乎是在同样的位置被切割。二价阳离子如Mn²⁺, Ca²⁺, Co²⁺以及Zn²⁺都是酶的激活剂。5 mM浓度的Ca²⁺可稳定酶免收蛋白水解酶的消化。最适pH在7-8之间。来自牛胰腺的DNAse I由四种色谱可区分的组分A，B，C和D组成，它们的摩尔比分别为4:1:1。仅发现少量D。2-巯*乙醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠（SDS）和肌动蛋白都已知可抑制酶的活性。

特点和优势

我们的脱氧核糖核酸酶DNAse I基本属于不含RNAse产品，支持该产品应用。

单位定义

一Kunitz单位的酶在以I型或III型DNA作为底物时，在 pH 5.0，37°C的条件下在每mL中每分钟可引起0.001的A₂₆₀改变。

外形

粗制品，含有氯化钙

制备说明

溶液0.15 M NaCl的10 mg/mL DNAse I溶液分装保存在−20 °C一周后可能会丢失<10%的活性。同样的溶液保存在2-8 °C则可能丢失约20%的活性。当在pH 5和7之间时，它可在60 °C维持活性最长达五小时，并在68 °C <10分钟内丢失活性。它在乙酸缓冲液（pH 5.0）和tris缓冲液((pH 7.2)，1 mg/mL浓度)中以6%/小时的速率丢失活性。

分析说明

通过缩二脲法测定的蛋白质。