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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
55
- 英文名:
比基尼链霉菌
- 供应商:
上海博湖
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
冻干粉
比基尼链霉菌价格培养及打管说明
1、安瓿瓶开封:用浸过75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、菌株恢复培养:用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基,滴入安瓿管内,轻轻振荡,使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液,移植于1-2支建议的培养基试管中,并在建议的条件下培养。
3、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在6-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需要连续两次继代培养才能正常生长
4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。
5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。
比基尼链霉菌价格菌种的培养:
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在上延续使用半年左右。
6、如果有些菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
比基尼链霉菌价格传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。
液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法:
① 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
比基尼链霉菌价格常用的冷冻保存法:
① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是适用范围最广的微生物保存法。
Sabouraud'sAgar,Modified
玉米粉琼脂培养基 250(g) incubation media 玉米粉琼脂培养基 250(g)
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LIM培养基250用于链球菌的分离培养(Japan方法)incubationmediaLIM培养基250用于链球菌的分离培养(Japan方法)
BTB培养基 250g 用于弧菌选择性增菌培养
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文献和实验放线菌属于原核生物系统进化树上的(G+C)摩尔百分含量(mol%)高的革兰氏阳性菌(Eubacteria)分枝类群,它虽然具有原核生物特有的分子生物学特性,但在其不同类群中,细胞壁的化学组分变化很大。在做大肠杆菌超声时,采用的是400W,破碎5s停5s的方法,效果不错,但是用在链霉菌上,由于细胞壁组成差异一般没什么效果。 链霉菌(放线菌)超声破碎前处理
遗传作图相关技术链霉菌孢子悬液的制备从已经长好的固体培养基上用棉签刮取孢子,使孢子悬浮于离心管中的无菌水中;将离心管放在振荡器上尽可能地激烈振荡1分钟左右;用装有脱脂棉的试管过滤悬液以除去菌丝片段和固体培养基碎片;3000转/分离心5-10分钟以使孢子沉淀,停止离心后马上倒掉上清液;将离心管在振荡器上振荡几秒钟使孢子沉淀物分散于残存的一点无菌水中;加入无菌的20%甘油于-20℃保存。链霉菌中NF的证明链霉菌中的普通致育型因子(NF)能够产生次甲基霉素,能将旁边不携带NF的链霉菌杀死。将待证明
1、将适量的菌体悬浮于500μl溶菌酶溶液(2%)中,37℃温育1hr 左右至完全溶菌,2、加入500μl碱性SDS溶液(0.3mol/L NaOH, 2%SDS),立即振荡混合完全,3、打开管盖,在70℃放置15min(对大于20kb的质粒则最好放在55℃, 30min),然后于水浴中冷却至室温,4、加入100μl酸性苯酚/氯仿溶液,用混合器振荡至液体彻底混合均匀,12000rpm离心5min,移取上清液,弃去白色中间层。5、用中性苯酚/氯仿重复抽提直至看不见(或非常少)中间
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