免疫荧光试剂盒(大鼠源一抗)(Cy3)

特别提示：包括免疫荧光试剂盒(大鼠源一抗)(Cy3)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：免疫荧光试剂盒(大鼠源一抗)(Cy3)
英文名称：Immunofluorescence kit For Primary Antibody From Rat (Cy3)
产品货号：ZN1858
产品规格：100T|200T|500T

本试剂盒采用SABC系统，是专为免疫化学而设计的，用以显示组织或细胞中的抗原分布。SABC-Cy3代表了新一代的免疫荧光方法。Cy3比传统上的荧光更具有亲水性，因而不会因疏水性而引起非特异性吸附或聚合，从而背景更低。而且其敏感性和稳定性都更好。Cy3在554nm激化，在568-574nm发射荧光，呈鲜红色。

试剂盒组成：

组分	规格
正常浓缩兔血清(稀释比1:10)	1ml/2ml/5ml
生物素标记兔抗大鼠IgG(参考效价1:100)	0.1ml/0.2ml/0.5ml
SABC-Cy3(参考效价1:100)	0.1ml/0.2ml/0.5ml

另附有三个滴瓶可供稀释试剂用

保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。

石蜡片染色步骤：
1. 切片脱蜡至水。
2. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
3. 封闭：滴加稀释的正常山羊血清封闭液(稀释比1:10),室温20分钟，甩干，勿洗。
4. 滴加适当稀释的一抗(大鼠IgG)，37℃孵育 1~2小时或4℃过夜。PBS洗5分钟×3次。
5. 滴加稀释的生物素标记兔抗大鼠IgG(参考效价1:100),37℃孵育 30分钟。PBS洗5分钟×3次。
6. 滴加稀释的 SABC-Cy3(参考效价1:100)，37℃孵育30分钟。PBS洗5分钟×4 次。
7. 水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。荧光显微镜观察。

建议：
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954，与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。

除了免疫荧光试剂盒(大鼠源一抗)(Cy3),，我公司还供应以下相关产品：



名称：Western半干法转膜液
货号：YT064
规格：1L|10×1L
本品可以用于Western时半干法电转膜。本Western半干法转膜液是一种安全无毒的转膜液，没有使用剧毒的*醇，也没有使用其它的有毒试剂。配制Western 半干法转膜液的方法非常便捷，不需要调节pH值。本Western转膜液共1瓶，可以配制1升Western半干转膜液。

注意事项：
1. 配制好的半干法转膜液可室温或4℃保存。配制好的半干法转膜液长期存放后，如果颜色变成浅棕色或黄褐色，应丢弃。
2. 需使用分析纯级别的乙醇或纯度更高的乙醇。

储存条件：室温，有效期两年。

名称：通用型强力抗原修复液(10X)
货号：YT083
规格：100ml
本修复液的抗原修复效果总体上要优于常用的柠檬酸钠抗原修复液。

细胞或组织用多聚甲*、甲醛或其它醛类试剂固定后，会导致蛋白之间的交联(cross-link)，从而遮蔽样品的抗原位点，导致免疫染色时染色信号减弱，甚至出现一些假阳性染色结果。

本抗原修复液采用了可以直接逆转醛类固定试剂交联作用的试剂，可以非常有效地去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联，充分暴露石蜡切片等样品中的抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。

通常石蜡切片都需进行抗原修复处理，而冰冻切片可以不进行抗原修复处理。抗原修复会大大改善石蜡切片的免疫染色效果，但对于冰冻切片的染色效果很多文献资料表明也有显著改善。特别是当冰冻切片免疫染色效果欠佳时，可以考虑尝试进行抗原修复。从原理上来看，无论冰冻切片还是细胞爬片等，只要是用多聚甲*、甲醛或其它醛类试剂固定的样品，进行抗原修复都会有效去除蛋白之间的交联，充分暴露抗原表位，从而大大改善免疫染色效果。

本产品对石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片或涂片等样品均适用。

一个包装的本产品可以配制成1000毫升抗原修复液(1X)。按照每个片子需要10毫升抗原修复液(1X)计算，一个包装的本产品可以用于100个样品。

注意事项：
1. 抗原修复过程可以使用百奥莱博的染色缸和染色架或邮寄夹进行操作。塑料染色缸、染色架和邮寄夹可以很好地耐受沸水浴，而玻璃染色缸需避免骤冷骤热导致的玻璃破碎。
2. 本抗原修复液使用前必须用重蒸水或Milli-Q水稀释10倍，配制成抗原修复液(1X)。
3. 通用型强力抗原修复液（10X）含有低浓度的有毒试剂，请注意小心防护。

储存条件：4℃，有效期一年。

名称：SDS-PAGE凝胶制备试剂盒(30-50 gels)
货号：ZN1888
规格：1盒
产品规格：可制 30-50块凝胶
主要成份：
1．30% Acr-Bis(29:1)100ml
2．1.5M Tris-HCl,pH8.8 100ml
3．10% SDS 5ml
4．Ammoniμm persulfate(*硫酸铵)0.5g
5．TEMED 1ml
6．1M Tris-HCl,pH6.8 15ml
产品保存：
1M Tris-HCl,pH8.8、10% SDS、Ammonniμm persulfate(*硫酸铵)和 1M Tris-HCl,pH6.8 室温保存。30% Acr-Bis(29:1)和 TEMED 4℃避光保存。*硫酸铵配制成10%溶液后，分装成小管-20℃保存，通常半年内有效。
产品说明：
凝胶配制试剂盒提供了配制 PAGE 凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可配制 PAGE 胶了。凝胶配制试剂盒不仅可用于配制 SDS-PAGE凝胶，也可用于配制非变性(native)PAGE 凝胶。本试剂盒约可配制 30-50 块常规大小的PAGE胶(即聚丙*酰胺凝胶)。
注意事项：
1.*硫酸铵配制成 10%溶液后，应当-20℃保存。同时应尽量减少室温存放时间，以防失效。
2.TEMED 易挥发，使用后请盖紧瓶盖。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切，可通过适当调节 TEMED的用量，控制在不同的室内环境下凝胶凝聚的速度。
3.TEMED 有腐蚀性，请注意防护。

名称：Western Blotting DAB显色法检测试剂盒(黄色)(山羊IgG)
货号：ZN1936
规格：1盒
工作原理：聚合标记法是一种酶标记方法，其敏感性比普通酶标法有明显提高。用于 Western Blotting的免疫学检测，更能体现其优点。不仅能大量地节约一抗，更重要的是使条带更清晰，甚至能检测出普通酶标法无法检测出的微量条带。DAB 是过氧化物酶最重要的显色剂之一，反应产物为不溶于水、二*苯和醇的棕色沉淀物，适合于免疫印迹的显色反应。本产品采用特殊配方，具有操作简单，储存稳定，信号灵敏度高，持续时间长，背景低，结果易保存等优点。
保存条件：－20℃冷冻保存。DAB 显色试剂应避光保存。
有效期：一年。
试剂盒的内容：
(1)封闭试剂：10 g 蛋白干粉×2 包。
(2)浓缩抗体稀释液：20 ml×1 瓶，为10倍浓缩液。
(3)聚合过氧化物酶标记兔抗山羊IgG0.2ml，效价 1：200-400。亲和纯化抗体，经聚合法标记过氧化物酶。
(4)DAB显色试剂，含：
显色剂 A：DAB×40倍浓缩液，3ml。
显色剂 B：H2O2×40倍浓缩液，3ml。
显色剂 C：×40倍 TBS 浓缩缓冲液，3ml。
使用说明：
需要而未提供的试剂和器材：
1．转印了蛋白样品的NC 膜或PVDF 膜：通过 SDS-PAGE 凝胶电泳分离蛋白质抗原，将 PAG 胶上的蛋白质转印到硝酸纤维素膜(NC 膜)或PVDF 膜上。
2．稀释缓冲液：使用中性稀释缓冲液即 0.02 M PBS或0.02M TBS(AR0144)配制封闭液和抗体稀释液。0.02 M PBS(pH7.2-7.6)：1000 ml 蒸馏水加 Na2HPO4 2.8 g ，NaH2PO4 0.4 g，NaCl 8.5 g。如果用的是含水磷酸盐，应加上分子式中水的含量。0.02M TBS(pH7.2-7.6)：1000ml 蒸馏水中加 Tris 2.42g,NaCl 9g; 纯乙酸或浓盐酸调节 pH 值(7.2-7.6)。
3．洗涤缓冲液：每 1000ml 中性稀释缓冲液中加入 0.5 ml Tween20 即可。
4．一抗：选择适合的一抗，用抗体稀释液稀释相应的一抗，一般特异性抗体工作浓度为1μg/ml,具体的稀释度取决于特异性的一抗和膜上的抗原的量。
5．摇床：膜的封闭、抗体孵育和洗涤都需平稳摇晃，需在摇床上操作。
6．相机：记录结果。
操作程序：
1．通过聚丙*酰胺凝胶电泳分离蛋白样本和分子量标准。
2．将蛋白样本转移至硝酸纤维素膜或PVDF 膜上。
3．封闭硝酸纤维膜：用封闭蛋白干粉 2 g,加稀释缓冲液 100 ml，20-37℃封闭 1-2 小时。用量以浸没整张膜为准。
4．用洗涤缓冲液洗涤硝酸纤维素膜 5分钟,1次。
5．配制抗体稀释液：取 90 ml 稀释缓冲液加 1 g 封闭蛋白干粉和 10 ml浓缩抗体稀释液即可。一抗、二抗均用此稀释液稀释。
6．硝酸纤维膜孵育一抗：用抗体稀释液稀释相应的一抗，一般特异性抗体浓度 1μg/ml,20-37℃孵育2 小时左右。如果缺乏特异性的条带或阳性不强，应提高一抗的浓度；如果有非特异性的条带，应提高一抗的稀释度。
7．用洗涤缓冲液振荡洗涤硝酸纤维素膜 3次,每次 5分钟。
8．硝酸纤维膜孵育二抗：用抗体稀释液稀释相应的酶标二抗，效价 1：200-400。37℃孵育一个半小时左右。用户可根据实际染色情况对稀释度做适当调整。
9．用洗涤缓冲液振荡洗涤硝酸纤维膜 4次,每次 5分钟。
10．DAB 显色:使用 DAB 显色试剂。按每 2 ml 蒸馏水加显色剂 A，B，C 各１滴，混匀。混匀后加至膜上。室温显色。一般显色 1－30分钟。
若无背景出现则可继续显色。显色后用蒸馏水洗涤以终止反应。
11．观察，照相。
注意事项：
1．试剂频繁使用时置４℃，不常使用时置－20℃。显色剂 A 需置－20℃冷冻保存。如有结晶析出，应确保结晶完全溶解再行使用。
2．显色工作液应新鲜配制。