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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
173
- 英文名:
Instant Immunohistochemistry Kit For Primary Antibody From Rat(AP Chromogenic System)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
80T|160T
特别提示:包括即用型免疫组化试剂盒(大鼠源一抗)(AP显色体系)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:即用型免疫组化试剂盒(大鼠源一抗)(AP显色体系)
英文名称:Instant Immunohistochemistry Kit For Primary Antibody From Rat(AP Chromogenic System)
产品货号:ZN1822
产品规格:80T|160T
本试剂盒采用SABC系统,适于一抗为大鼠来源的抗体。SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素对生物素分子有极高的亲和力,是一般抗原抗体亲和力的一百万倍,等电点 pI=6.0~6.5,对组织和细胞的非特异吸附很低。根据研究,SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶可以保证SABC具有很高的敏感性。所以 SABC 兼具高敏感性,低背景和操作简便等优点。百奥莱博采用独特方法生产的SABC不仅有很强的信号放大作用,而且非常稳定。
试剂盒组成:
| 组分 | 规格 |
| 5%BSA封闭液 | 6ml/12ml |
| 生物素标记兔抗大鼠IgG | 6ml/12ml |
| SABC | 6ml/12ml |
保存条件:4℃可保存一年,应避免冷冻。
石蜡片染色步骤:
1. 石蜡切片,常规脱蜡至水。
2. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
3. 封闭。滴加5%BSA封闭液,37℃孵育30 分钟。甩干,勿洗。
4. 滴加适当稀释的一抗(大鼠IgG),37℃孵育 1~2 小时或4℃过夜。0.01M TBS(ZN1953)洗5分钟×3次。
5. 滴加生物素标记兔抗大鼠IgG ,37℃度孵育30分钟。0.01 M TBS洗5分钟×3次。
6. 滴加 SABC—AP,37℃孵育30分钟。0.01M TBS洗5分钟×4 次。水洗1 次。
7. 显色:BCIP/NBT 用 0.01M TBS(pH9.0-9.5)按 1:20 的比例稀释,混匀后加至切片。镜下控制反应时间。蒸馏水洗涤。
8. 核固红轻度复染。水洗,干燥后水溶性封片剂封片(ZN2946)。
建议:
1. 对于 AP(碱性磷酸酶)显色系统,请用不含磷酸根的缓冲液洗涤,如 TBS缓冲液。
2. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
3. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954,与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。
除了即用型免疫组化试剂盒(大鼠源一抗)(AP显色体系),,我公司还供应以下相关产品:
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文献和实验用于免疫检测的特殊配方的抗体稀释液,可以促进抗原抗体特异性结合,产生比传统方法高几倍或十几倍的信号强度,从而解决免疫检测实验中(比如免疫印迹,ELISA等)经常遇到的低灵敏度和高背景强度等问题,得到准确清晰的实验结果。 试剂盒操作简单方便,含有溶液1和2两种即用型溶液,分别用做一抗和二抗的稀释液,替代其他的传统稀释缓冲液,包括TBS,TBST,PBS,PBST等。其余操作均按照标准的免疫检测操作流程进行。此外,试剂盒中各组分对标记抗体的酶活性(辣根过氧化物酶HRP,碱性磷酸酶AP等)均没有影响
与其他免疫组化染色基本相似,有良好的可操作性。尽管SABC法操作简便,敏感性强,但是,在操作中仍然要遵循一定的原则,才能得到可信度高的结果。我所做的是《……》(题目略去,是2003年获国家自然科学基金专项基金项目,批准号:302400**)的动物实验部分。其中,需要利用抗β1-integrin观察深Ⅱ度烫伤大鼠局部在微电流治疗后β1-integrin的分布情况。应用的方法就是SABC法,试剂盒(即用型)来自博士德公司(不是为该公司做广告)。下面就按照实验步骤,谈一下我的一些体会。1、载玻片防脱片剂处理
2): 图2 肝微粒体制备流程图 3.2 体外孵育体系的建立 CYP450酶代谢表型研究的肝微粒体体外孵育体系,是由制备的肝微粒体辅以氧化还原型辅酶,再加入酶特异的选择性抑制剂,在模拟生理温度及生理环境的条件下进行生化反应的体系。 推荐使用的孵育体系为:每个孵育体系总体积为200 µL,体系包括0.1M PH 7.4 的磷酸缓冲液,汇智和源NADPH再生系统(1mM NADP,5 mM的6-磷酸葡萄糖,1 U/mL 6-磷酸葡萄糖脱氢酶,3.3 mM的氯化镁);适当浓度的肝微粒体蛋白;适量的选择
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