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- IPVH00010
- 2025年07月09日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 规格：
26.5 x 3.75m
- 0.45µm 孔径
- 建议用于大多数免疫印迹，特别在蛋白质大于 20kDa 时
- Millipore 的快速免疫检测实验方法不需要膜封闭并缩短洗涤时间，将检测时间至少减少了两个小时，而不致降低灵敏度或特异性
用于高通量实验室的印迹三明治
- 当您需要处理多个印迹时，印迹三明治是一种便利省时的选择。 我们的印迹三明治包含多片 Immobilon-P 膜，其中插入了按规格裁切的多张层析级印迹纸。
与硝酸纤维素膜相比，Immobilon 膜具有多种优点。 它们不易破裂或卷曲，便于裁剪且在切割过程中不会碎裂。 它们还有低背景、广泛溶剂相容性以及优异的着色能力。 此外，它们可以重复检测。
| 相容的染液/染色剂 | |
| Immobilon-P | 考马斯亮蓝染色剂 酰胺黑 印度墨水 丽春红 胶体金和 CPTS CPTS 甲苯胺蓝 透射显影和 Sypro® ruby |
| Immobilon-P | Immobilon-PSQ | Immobilon-FL | |
| 滤膜材料 | Hydrophobic PVDF | Hydrophobic PVDF | Hydrophobic PVDF |
| 滤膜孔径， µm | 0.45 | 0.45 | |
| 蛋白质结合量，µg/cm2 | |||
| 胰岛素 | 160 | 262 | 155 |
| BSA | 215 | 340 | 205 |
| 山羊 IgG | 294 | 448 | 300 |
使用 Immobilon-P 膜的快速免疫检测实验方案
| 步骤 | 标准免疫检测 | 快速免疫检测 |
| 1. 封闭膜 | 1h | 无 |
| 2. 与一抗保温反应 | 1h | 1h |
| 3. 洗膜 | 3 x 10min | 3 x 5min |
| 4. 与二抗保温反应 | 1h | 30min |
| 5. 洗膜 | 3 x 10min | 3 x 5min |
| 6. 加入底物 | 5min | 5min |
| 总时间 | 4h 5min | 2h 5min |
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文献和实验。但不适合荧光。PVDF膜特别注意的是需要100%甲醇预处理(不超过15秒)再用缓冲液平衡，才能用，而且适用过程中万一干了也要同样程序再处理(不过要真出现这种问题也是自己欠扁，谁要你不小心呢，转膜前处理也就罢了，转膜后再这样处理可能会影响后继的抗体识别呢)。PVDF膜同样分0.45um和0.2um的，后者孔径小，对小分子蛋白有较好的拦截吸附，背景可能会比前者稍高。 pvdf膜生产商： MILLIPORE 特价 常年 现货 IPVH00010 0.45um
转印夹，注意 PVDF 膜与胶，PVDF 膜与滤纸，滤纸与胶之间不可有气泡。 2） 转印槽加满转膜缓冲液，插入电转印夹，将转印槽放入冰水中，确保 PVDF 膜靠近正极，带负电的氨基酸和蛋白质向正极迁移。 3） 转膜选择恒流，每个转印槽建议电流为 150-300 mA，时间依据目的蛋白条带分子量大小做适当调整。 4） 转膜结束后，将 PVDF 膜置于丽春红染色液中，室温 5-10 分钟即可见红色条带，用洗涤缓冲液洗数次可洗掉红色条带进行后续实验 。 封闭 1） 漂洗印迹膜：使用洗涤缓冲液室温适当漂洗
免疫印迹(Western blot)简介和原理 免疫印迹用于鉴定能够与特异性抗体相互作用的大分子抗原（一般为蛋白质）并测定抗原的大小。蛋白质首先通过 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，再通过电泳转移到固相支持物上，固相支持物包括硝酸纤维素膜，聚偏乙烯二氟（PVDF）膜和阳离子尼龙膜等。首先把膜上未反应的位点封闭起来以抑制抗体的非特异性吸附，这样固定的蛋白即可与特异性的多克隆或单克隆抗体相互作用。最后通过放射，生色或化学发光的方法进行定位。 实验常规试剂 1.0 mol/L Tris•HCl
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