XTT细菌增殖及细菌毒性检测试剂

特别提示：包括XTT细菌增殖及细菌毒性检测试剂在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：XTT细菌增殖及细菌毒性检测试剂
英文名称：XTT Bacteria Proliferation and Cytotoxicity Kit
产品货号：KFS318
产品规格：500T|1000T

XTT(二甲氧唑黄)是一种类似于MTT 的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，活细菌线粒体中存在与辅酶Ⅱ相关的脱氢酶，可将黄色的XTT 还原成水溶性的橘黄色的甲月赞。生成的甲臜能够溶解在组织培养基中，不形成颗粒，可直接用酶联免疫检测仪检测定吸光值。

注意事项
1. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应，如果待检测体系中存在较多的还原剂，例如一些抗氧化剂会干扰检测，需设法去除。
2. 如果待测溶液有还原性，测定不含细菌，但含有XTT 的待测溶液在450 nm 处的空白吸光度。如果该吸光度很小，则可以直接加入XTT ，如果吸光度相对较大，则需要除去培养基，并用培养基洗涤细菌两次，然后加入新的100 μl 培养基和20 μl XTT 工作液进行检测。
3. 用酶标仪检测前请确保孔内没有气泡，否则会干扰测定。
4. 为保证您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作方法
1. 96 孔板加入细菌100μL/孔（约1×104），置37℃ 5%CO2 细菌培养箱培养24 小时。2.加入适当浓度的受试化合物。3.将96 孔板在37℃，含5% CO2 空气及100%湿度的细菌培养箱中孵育适当时间。
4. 向各孔中加入20 μl 的XTT 工作液。
5. 37℃下孵育1~4 小时。
6. 酶标仪在450nm 波长处检测每孔的光密度。

结果分析
1. 细菌的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（完全培养基加XTT 工作液，无细菌）或空白药物孔OD 值（完全培养基加受试药物的不同稀释度加XTT 工作液，无细菌），各重复孔的OD 值取均数±SD。细菌的存活率以T/C%表示，T 为加药细菌的OD 值，C 为对照细菌的OD 值。细菌存活率% =（加药细菌OD/对照细菌OD）×100
2. 求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。

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