G250蛋白快速染色试剂

特别提示：包括G250蛋白快速染色试剂在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：G250蛋白快速染色试剂
英文名称：ShowProtein-G250 Protein Stain Reagent
产品货号：WE0290
产品规格：250ml

  该产品是以考马斯亮蓝G-250染料为基础，应用于SDS-PAGE凝胶的快速蛋白染色试剂。灵敏度高，最低可检测到20ng蛋白。染色过程简单，快速，无需孵育，染色后直接水洗，即可产生清晰背景。

注意事项：
1、若要获得最佳的脱色效果，可多次重复脱色步骤或在去离子水中脱色过夜。
2、将凝胶加入染色液后加热至沸腾，继续在脱色摇床上摇动5分钟，可增强染色效果。
3、本产品可重复使用2-3次，染色效果会随使用次数增加有所减弱。
4、本产品有轻微腐蚀性，请带手套操作。

操作步骤：
1、将电泳后的 PAGE 胶取出放入容器中，加入适量纯水(以充分覆盖PAGE 胶为宜)，加热至沸腾后停止，弃去液体。
2、加入适量快速染色液(液面覆盖凝胶即可)，加热至沸腾后停止，弃去染色液。
3、加入适量蒸馏水，加热至沸腾后停止，倾去蒸馏水，重复此步骤脱色至背景清晰。

实验图例

使用ShowProtein-G250蛋白快速染色试剂对SDS-PAGE染色后，不同浓度蛋白染色结果

储存条件：-20℃


除了G250蛋白快速染色试剂,，我公司还供应以下相关产品：



名称：蛋白酶抑制剂混合液
货号：BTN80808
规格：1mL
组织/细胞裂解时会释放出大量的内源性蛋白酶，引起蛋白质的降解，影响试验结果。加入外源性蛋白酶抑制剂，抑制蛋白酶的活性，防止蛋白降解，已经成为蛋白质研究的常规操作。

产品特点：
1. 即开即用，不需要单独购买每个成分再配制。
2. 抑制谱广，由多种蛋白酶抑制剂组成，能特异性抑制丝氨酸蛋白酶(Serine Protease)、半胱氨酸蛋白酶(Cysteine protease)、天门冬氨酸蛋白酶。
3.与各种细胞裂解液兼容，可以共同使用。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：临用前室温融解蛋白酶抑制剂复合物(100×)，混匀，按照1:100 比例加入到组织细胞裂解液中。

注意事项：
1.蛋白酶抑制剂复合物在水溶液中极不稳定，15分钟即可水解掉～50%的活性，需临用前加入。
2. 避免反复冻融，可分装储存。

名称：3%*氧水
货号：SNM492
规格：100ml

名称：1M Tris(pH6.8)
货号：RFT062
规格：100ml|500ml
本品用于SDS-PAGE浓缩胶制备。

名称：Western半干转转膜液
货号：RFT079
规格：10×1L
本Western半干法转膜液是一种安全无毒的转膜液，没有使用剧毒的*醇，也没有使用其它的有毒试剂。配制Western 半干法转膜液的方法非常便捷，不需要调节pH值。本Western转膜液共1瓶，可以配制1升1×Western半干转膜液，用于Western时半干法电转膜。

使用方法：
1、取一瓶可以配制1升Western转膜液的粉剂，倒入到一洁净的烧杯中，加入蒸馏水到约700毫升，溶解。
2、再加入200毫升无水乙醇或210毫升95%乙醇，混匀。
3、然后在量筒中用蒸馏水定容到1升。混匀后即可使用，无需调节pH值。没有用完的转膜液可室温或4℃保存，通常两周内使用没有任何问题。当转膜液颜色变为浅棕色或黄褐色时，应该丢弃。

注意事项：
1、配制好的半干法转膜液可室温或4℃保存。配制好的半干法转膜液长期存放后，如果颜色变成浅棕色或黄褐色，应丢弃。
2、需使用分析纯级别的乙醇或纯度更高的乙醇。

储存条件：室温，有效期2年。

名称：SDS-PAGE电泳液(干粉)
货号：KFS059
规格：10×1L
本产品作为蛋白电泳缓冲液，含有0.25M Tris、1.92M 甘氨酸。适用于变性聚*烯酰胺凝胶电泳。

每个包装单独加蒸馏水溶解，定容到1L 即可使用。

注意事项
配制好的电泳液使用时间不宜超过两周。
回收的电泳液可以重复使用，但为了取得最佳的电泳效果，应使用没有使用过的电泳液。
为了您的安全和健康，请做好实验防护工作。

名称：免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶磷酸酶抑制剂)
货号：SY0319
规格：100ml
本品WB/IP裂解液，是一种非变性条件下的裂解液，可以有效维持原有的蛋白间的相互作用。其主要裂解成分为1%的Triton X-100，不含蛋白酶、磷酸酶等抑制剂，裂解得到的蛋白样品可用于Western、IP、CoIP以及许多兼容1%Triton X-100的酶活性或者生物小分子的检测。

注意事项

1）本品不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂，使用前请根据实验情况添加合适酶抑制剂或不加酶抑制剂。
2）裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3）如果WB/IP裂解液得到的蛋白样品是用于酶活性测试或一些生物小分子的检测，需要测试标准品用该裂解液稀释后是否会显著影响标准曲线，如无显著影响，则可继续使用。
4） 用WB/IP裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
5）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

(一) 细胞样品
1）融解WB/IP裂解液（无抑制剂），混匀。取适当量的裂解液，根据实验目的决定是否添加适当酶抑制剂。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液清洗细胞一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，需分装成5×105～1×106个细胞/管，然后再裂解。因为大团细胞较难裂解充分，而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触，相对比较容易裂解充分。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀、免疫共沉淀、酶或生物小分子检测等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入100μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150μl或200μl。

（二）组织样品：

1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解WB/IP裂解液（无抑制剂），混匀。取适当量的裂解液，根据实验目的决定是否添加适当酶抑制剂。
3）按照每20mg组织加入100-200μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。