SgrAI限制性内切酶

SgrAI限制性内切酶

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      368

    • 英文名

      SgrAI Restriction Endonuclease

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

      5KU|1KU

    特别提示:包括SgrAI限制性内切酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:SgrAI限制性内切酶
    英文名称:SgrAI Restriction Endonuclease
    产品货号:SV0699
    产品规格:5KU|1KU

    在不同反应缓冲液的活性:
    BalbBuffer 1.1: 100%
    BalbBuffer 2.1: 100%
    BalbBuffer 3.1: 10%
    CutSmart Buffer: 100%
    特性:
    CutSmart、重组酶。
    反应条件:
    CutSmart 缓冲液,37℃。
    热失活:65℃ 20 分钟。
    浓度:
    10,000units/ml。
    甲基化敏感性:
    对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
    注意事项:
    如下条件可能出现星号活性:延时酶切、高酶浓度:或甘油浓度:>5%。

    除了SgrAI限制性内切酶,,我公司还供应以下相关产品:



    名称:DNase I干粉
    货号:BTN131230
    规格:100mg
    本产品是牛胰DNase I的冻干粉,可以配制成DNase I溶液用于各种分子生物学实验。

    储存条件:低温运输,4℃或-20℃保存,有效期两年。

    注意:DNase I非常容易吸附到玻璃表面,所以应避免与玻璃接触。

    名称:M-MLV反转录酶II(RNase H-)(逆转录酶)
    货号:YT394
    规格:2000U|10KU|50KU
    本品是一种经过改造和优化的M-MLV反转录酶,具有正常的依赖于RNA或DNA模板的DNA聚合酶活性,能够以RNA或DNA为模板,在引物存在的情况下进行互补DNA链的合成,即可以进行cDNA(complementary DNA)的第一链合成。

    本产品是最常用的反转录酶之一,广泛用于获得总RNA或mRNA后cDNA第一条链的合成,后续可以用于PCR、real-time PCR也称定量PCR(quantitative PCR, qPCR)、cDNA的第二链合成以及cDNA文库的构建等。本品还可以通过反转录用于DNA探针的荧光、生物素、Digoxin或同位素标记等,也可以通过引物延伸(primer extention)来分析和研究RNA。

    本产品无RNase H活性,反转录效率高、产物长度长。本产品与野生型M-MLV反转录酶相比,无RNase H活性,不能选择性剪切RNA和DNA杂合双链中的RNA,从而有助于高效合成长度更长的cDNA。本产品经测试可以轻松完成长度为8 kb及以下基因的反转录(参考图1),反转录的最大长度可以超过10kb。

    SgrAI限制性内切酶
    使用本品反转录总RNA后,对于不同长度的cDNA进行PCR扩增后的电泳效果图。图中可见对于0.2-8kb的cDNA可以非常高效地被反转录。

    本产品热稳定性高。最适反应温度为42-45℃,但当温度达到50℃时仍具有很高活性,且可获得较高产量的cDNA。

    SgrAI限制性内切酶
    在不同温度下的反转录效果。用从NIH3T3细胞抽提获得的总RNA 500 ng,在20μl的反转录体系中按照图中所示温度进行反转录。反转录完成后取1μl反转录产品进行目的基因的PCR扩增和电泳。

    本品是一种大肠杆菌重组高表达的的反转录酶,由于其表达量非常高,大大提高了本产品的性价比。本反转录酶含有从Moloney Murine Leukemia Virus reverse transcriptase基因克隆的缺失RNase H domain的pol基因,并进行了突变优化以提高其热稳定性、反转录效率和表达量。

    酶活性定义:One unit of the enzyme incorporates 1 nmol of dTTP into acid-precipitable material in 10 min at 37℃ using poly(A)·oligo(dT) 12-18 as template-primer。反应体系为 50 mM Tris-HCl(pH 8.3), 75 mM KCl, 3 mM MgCl2, 10 mM DTT, 0.5mM [3H]-dTTP and 0.4 mM polyA·oligo(dT)12-18。

    纯度:不含DNA内切酶、外切酶和磷酸酯酶和RNA酶,可以满足常规反转录合成cDNA第一条链等的需要。

    酶储存溶液:20 mM Tris-HCl (pH 7.5), 300 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 1 mM DTT, 0.01% NP-40 and 50% glycerol。

    失活或抑制:80℃孵育10分钟可以导致M-MLV反转录酶(RNase H-)失活;EDTA、EGTA等螯合剂、无机磷酸盐或焦磷酸盐以及聚氨(polyamine)对M-MLV反转录酶(RNase H-)有抑制作用。

    本产品中M-MLV反转录酶(RNase H-)的浓度为200U/μl,用于体积为20微升的反转录体系时足够进行10次反转录反应。

    储存条件:-20℃。

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