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- 文献和实验
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- 库存:
49
- 英文名:
详见说明书
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海莼试
- 保存条件:
-20℃或-80℃
- 规格:
1次
(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可!固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀
(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次
(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等体积的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)
(7)10,000rpm,4℃离心20min
(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚:5:24:1)抽提两次(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃离心20 min
(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC处理水溶解
(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量
(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)
96 孔板质粒 DNAout( 离心法 )1次规格介绍:

96 孔板质粒 DNAout( 离心法 )1次规格存新鲜组织样品:
1. 估计完全浸没样品所需要 RNALOCKER 的体积(1g 组织需 10 mL) RNA。
2. 标记收集管并加入估计所需量的 RNALOCKER。
3. 以zui快速度将样品剪切成厚度小于 0.5 cm 的碎块。注: 鼠肝、肾和脾等小器官样品和没有蜡质保护层的植物样品可不需剪切而直接放入本产品中保存,有蜡质保护层的植物样品需要先将蜡表皮破坏。
公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
96 孔板质粒 DNAout( 离心法 )1次规格服务流程:
1)客户提供材料
2)提取基因组RNA/DNA并确定其品质。
非冻型组织 RNA 保存液250mL图片客户提供:
新鲜材料或正确保存条件下材料(组织、细胞、细菌等)
4℃保存一周,-20℃保存一个月,-80℃保存一年血液样品(EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝)
详细的背景资料:来源、特点、类型等
我们提供:基因组RNA/DNA提取、实验报告
质量保证:高纯度RNA/DNA、完整货期:3-5个工作
以下是96 孔板质粒 DNAout( 离心法 )1次规格的相关产品正在热销:
ELL3 神经生因子调控抑制蛋白抗体规格: 0.2ml
NKR/Neurokin B receptor 神经激肽B受体抗体规格: 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG/Cy3 Cy3标记的兔抗猪IgG规格: 0.1mlCD83 CD83抗体规格: 0.2ml
phospho-SHC(Tyr349) 磷酸化SH2结构域转化蛋白1抗体规格: 0.1ml
DPPL1 磷脂酸磷酸酶HTPAP抗体规格: 0.2ml
Lumican 基膜聚糖蛋白抗体规格: 0.2mlNeuroligin 1 突触细胞粘附分子1抗体规格: 0.2ml
Insulin(1G11) 重组人胰岛素单克隆抗体规格: 0.1ml
IL-8/CXCL8 白介素8抗体 0.1ml
Donkey Anti-Guinea pig IgG/AP 碱性磷酸酶(AP)标记的驴抗豚鼠IgG规格: 0.1mlZnT-1 锌转运蛋白1抗体规格: 0.2ml
Mouse Anti-Goat IgG/FITC FITC标记的小鼠抗羊IgG规格: 0.3ml
FABPB 脑型脂肪酸结合蛋白抗体规格: 0.2ml
96 孔板质粒 DNAout( 离心法 )1次规格双硫磷(标准品) CAS: 3383-96-8 英文名称 Temephos 质量规格:分析标准品
氟乐灵标准溶液(10μg/ml,u=5%) CAS: 1582-09-8 英文名称 Trifluralin solution 质量规格:10μg/ml,u=5%
杀虫脲(标准品) CAS: 64628-44-0 英文名称 Triflumuron 质量规格:分析标准品
戊菌隆(分析标准品,99.5%) CAS: 66063-05-6 英文名称 Pencycuron 质量规格:分析标准品,99.5%
噻螨酮标准溶液(100μg/ml,u=3%) CAS: 78587-05-0 英文名称 Hexythiazox solution 质量规格:100μg/ml,u=3%
噻螨酮标准溶液(10μg/ml,u=6%) CAS: 78587-05-0 英文名称 Hexythiazox solution 质量规格:10μg/ml,u=6%
抑霉唑标准溶液(100μg/ml,u=2%) CAS: 35554-44-0 英文名称 Imazalil solution 质量规格:100μg/ml,u=2%
环草隆(标准品) CAS: 1982-49-6 英文名称 Siduron 质量规格:分析标准品
西玛津(标准品) CAS: 122-34-9 英文名称 Simazine 质量规格:分析标准品
西玛津标准溶液(10μg/ml,u=5%) CAS: 122-34-9 英文名称 Simazine solution 质量规格:10μg/ml,u=5%
辛硫磷标准溶液(100μg/ml,u=4%) CAS: 14816-18-3 英文名称 Phoxim solution 质量规格:100μg/ml,u=4%
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文献和实验采用Ostro 96孔样品制备板轻松提高DBS萃取物的洁净程度
%以上的PLs残留。Ostro 96孔板可通过使用96孔制备板的形式进一步简化DBS萃取流程,同时提取分析物、去除磷脂、过滤干血斑纸片。DBS样品可在孔内萃取并稀释直接进样到LC/MS/MS系统中。该创新方法能够显著降低样品制备时间,并在萃取转化、干燥、复溶过程中避免潜在的分析物流失。在本应用纪要中,我们同时应用了传统方法和Ostro 96孔样品制备板方法,对含有利培酮、利培酮羟基化代谢物、9-OH利培酮及其内标氯氮平(图1)的全血样品进行了萃取。 实验部分
试验原理:大量提取的质粒DNA一般需进一步纯化,常用柱层析法和氯化铯梯度离心法。常使用的所有纯化方法都利用了质粒DNA 相对较小及共价闭合环状这样两个性质。例如,用氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心分离质粒和染色体DNA 就取决于溴化乙锭与线状以及与闭环DNA分子的结合量有所不同。 溴化乙锭通过嵌入碱基之间而与DNA结合,进而使双螺旋解旋。由此导致线状DNA的长度有所增加,作为补偿,将在闭环质粒DNA中引入超螺旋单位。最后,超螺旋度大为增加, 从而阻止了溴化乙锭分子的继续嵌入。但线状分子不受此限
。7)用合适转头于室温以500转/分离心15分钟,回收核酸。如于4℃离心,盐也会了生沉淀。8)小心倒掉上清,敞开瓶口倒置离心瓶使残余上清液流尽,于室温用70%乙醇洗涤沉积管壁。倒出乙醇,用与真空装置相联的巴期德吸出附于瓶壁的所有液滴,于室温将瓶倒置放在纸巾上,使最后残余的痕量乙醇挥殆尽。9)用3ml TE(pH8.0)溶解核酸沉淀。10)纯化。四、质粒DNA的纯化聚乙二醇沉淀法质粒DNA氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA(一)聚乙二醇沉淀法提取质粒DNA1)将核酸溶液所得]转入15mlCorex
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