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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体名:
转录因子NAC1抗体
- 抗体英文名:
Anti-NAC1/BTBD14B
- 靶点:
详见说明书
- 浓度:
1mg/1ml
- 应用范围:
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
- 宿主:
详见说明书
- 供应商:
上海一研
- 库存:
44
- 级别:
详见说明书
- 目录编号:
详见说明书
- 抗原来源:
Rabbit
- 保质期:
详见说明书
- 适应物种:
详见说明书
- 标记物:
详见说明书
- 克隆性:
多克隆
- 保存条件:
Store at -20 °C
- 形态:
详见说明书
- 亚型:
IgG
- 免疫原:
KLH conjugated synthetic peptide derived from human NAC1/BTBD14B (311-400aa)
- 规格:
0.2ml/200μg
★分子生物学:质粒抽提、PCR、Q-PCR、RT-PCR、分子生物学:基因合成、引物合成、基因测序、载体构建等
★蛋白工程:原核、哺乳动物蛋白表达系统等
★病毒包装:腺病毒、慢病毒等
★抗体工程:磁珠分选、病理染色、WB、ELISA、IP、IF、IHC、FACS、Confocal等等
★细胞工程:细胞表型分析(凋亡、增殖、周期、迁移、侵袭、修复、克隆形成)、细胞培养、细胞膜制备、稳定细胞株构建、细胞RNAi技术等等。
转录因子NAC1抗体抗体的生物素化标记实验要点:
1.如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对 0.1mol/L碳酸氢钠缓冲液或0.5mol/L缓冲液充分透析;
2.所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件;
3.用NHSB量过量也是不利的,抗原的结合位点可能因此被封闭,导致抗体失活;
4.由于抗体的氨基不易接近可能造成生物素化不足,此时可加入去污剂如 Triton x-100, Tween20等;
5.当游离ε-氨基(赖氨酸残基的氨基)存在于抗体的抗原结合位点时,或位于酶的催化位点时,生物素化会降低或损伤抗体蛋白的结合力或活性;
6.生物素还可能与不同的功能基团,如羰基、氨基、巯基、异咪唑基及基,也可与糖基共价结合;
7.交联反应后,应充分透析,否则,残余的生物素会对生物素化抗体与亲和素的结合产生竞争作用;
8.在细胞的荧光标记实验中,中和亲和素的本底低,但由于链霉亲和素含有少量正电荷,故对某些细胞可导致高本底。
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转录因子NAC1抗体6-TAMRA CPG *1000 Å*6-TAMRA CPG *1000 Å*100 mg
6-TAMRA phosphoramidite 6-TAMRA 亚磷酰胺100 mg
BHQ-1 CPG *500 Å*BHQ-1 CPG *500 Å*100 mg
BHQ-1 CPG *1000 Å*BHQ-1 CPG *1000 Å*100 mg
pNPP [4-Nitrophenyl phosphate, disodium salt]对磷酸二钠盐10 g
pNPP [4-Nitrophenyl phosphate, disodium salt] 对苯磷酸二钠盐100 g
Luciferase 萤火虫荧光素酶1 mL
转录因子NAC1抗体英文名称 Anti-NAC1/BTBD14B
中文名称 转录因子NAC1抗体
别 名 BEND8; BTB Domain Containing 14B; BTB/POZ domain-containing protein 14B; btbd14b; btbd14b; FLJ37383; NAC-1; NAC1; Nacc1; NACC1_HUMAN; Nucleus accumbens-associated protein 1.
1
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 发育生物学 干细胞 转录调节因子
蛋白分子量 predicted molecular weight:
57kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human NAC1/BTBD14B (311-400aa)
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
(石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
产品介绍 NAC1 is an N-terminal homodimerization domain that contains multiple copies of kelch repeats and/or C2H2-type zinc fingers. Proteins that contain BTB domains are thought to be involved in transcriptional regulation via control of chromatin structure and function. BTBD14B (BTB/POZ domain-containing protein 14B), also known as NACC1 (nucleus accumbens associated 1), BEND8 or NAC1, is a 527 amino acid protein that localizes to both the nucleus and the cytoplasm and contains one BTB (POZ) domain. Existing as a homooligomer that interacts with HDAC3 and HDAC4, BTBD14B functions as a transcriptional repressor that influences the transcriptional activity of CRIF1 and is required for proteasome recruitment to the nucleus and cytoplasm in dendritic spines. BTBD14B is overexpressed in multiple carcinomas, suggesting a role in tumor development and metastasis.
Function :
Functions as a transcriptional repressor. Seems to function as a transcriptional corepressor in neuronal cells through recruitment of HDAC3 and HDAC4. Contributes to tumor progression, and tumor cell proliferation and survival. This may be mediated at least in part through repressing transcriptional activity of GADD45GIP1. Required for recruiting the proteasome from the nucleus to the cytoplasm and dendritic spines.
Subunit :
Homooligomer; mediated by the BTB domain. Interacts with HDAC3 and HDAC4. Interacts (via BTB domain) with CUL3, PSMD7 AND RCOR1.
Subcellular Location :
Nucleus. Cytoplasm. Distribution in the cytoplasm is dependent on phosphorylation.
Tissue Specificity :
Overexpressed in several types of carcinomas including ovarian serous carcinomas. Expression levels positively correlate with tumor recurrence in ovarian serous carcinomas, and intense immunoreactivity in primary ovarian tumors predicts early recurrence. Up-regulated in ovarian carcinomas after chemotherapy, suggesting a role in development of chemotherapy resistance in ovarian cancer.
DISEASE :
Overexpressed in several types of carcinomas including ovarian serous carcinomas. Expression levels positively correlate with tumor recurrence in ovarian serous carcinomas, and intense immunoreactivity in primary ovarian tumors predicts early recurrence. Up-regulated in ovarian carcinomas after chemotherapy, suggesting a role in development of chemotherapy resistance in ovarian cancer.
Similarity :
Contains 1 BEN domain.
Contains 1 BTB (POZ) domain.
Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q96RE7.1
转录因子NAC1抗体抗体的鉴定:
1)抗体的效价鉴定:不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2)抗体的特异性鉴定:抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
如果所用抗原浓度IC50浓度为pg/管,而一些近似抗原物质的IC50浓度几乎是无穷大时,表示这一抗血清与其他抗原物质的交叉反应率近似为0,即该血清的特异性较好。
3)抗体亲和力:是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。抗体亲和力的测定对抗体的筛选,确定抗体的用途,验证抗体的均一性等均有重要意义。
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文献和实验基因表达调控的重点。现在的基因数据库信息丰富,拿到基因及其启动子序列非常简单。那么问题又来了,拿到启动子序列以后,下一步怎么找相关的调控蛋白/转录因子呢?生物信息学方法预测?你会得到很多可能的目标调控蛋白/转录因子,还要做实验一个一个验证。凝胶迁移(EMSA),染色质免疫共沉淀(ChIP)?只能针对已知能与启动子结合的调控蛋白/转录因子,而且还需要相应探针/抗体,对于大量筛选无能为力。美国Signosis的转录因子(结合启动子)微孔板芯片检测试剂可以方便、高效地解决这一问题。该方法专门用于筛查与特定DNA序列
原理: 将染色质和与之相互作用的转录因子和组蛋白通过甲醛等物质交联起来,然后通过超声将染色质打碎成小片段,加入针对特定转录因子或特殊修饰的组蛋白抗体,通过 Protein A/Protein G 微球或磁珠将抗体-转录因子-染色质复合物拖下来,通过 PCR 或测序的方法检测与目的蛋白相结合的 DNA 序列,进而研究这些转录因子在细胞发育或者生长中的作用位点。 ✦ ChIP-seq: ChIP-seq 将 ChIP 技术与二代测序相结合,将 ChIP 下来的 DNA 进行二代测序文库构建,能够获取
电极移动距离的大小是同其分子量的对数成反比。如果某种 DNA 分子结合上一种特殊的蛋白质,那么由于分子量的加大它在凝胶中的迁移作用便会受到阻滞,于是朝正极移动的距离也就相应的缩短,因而在凝胶中出现滞后的条带,这就是凝胶阻滞实验的基本原理。 3. 过程: 首先制备细胞蛋白质提取物(理论上其中含有某种特殊的转录因子) 用放射性同位素标记待检测的 DNA 片段(含有转录因子的结合位点) 这种被标记的探针 DNA 同细胞蛋白质提取物一起进行温育,于是产生DNA -蛋白质复合物,在控制使 DNA -蛋白质保持结合状态
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