肽 N-糖苷酶 F（无甘油）

特别提示：包括肽 N-糖苷酶 F（无甘油）在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：肽 N-糖苷酶 F（无甘油）
产品货号：SV1499
产品规格：75KU|15KU

特性:
去除糖蛋白的 N-连接糖
概述:
肽 N-糖苷酶 F，即 PNGase F，是一种酰氨酶，可以在 N-连接糖蛋白的高甘露糖、杂合和复合寡糖部分最内侧的 N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨残基之间进行切割。PNGase F 还以不含甘油的形式提供，便于在 HPLC 方法中取得最佳效果。
来源:
从脑膜败血性黄杆菌（Flavobacterium meningosepticum）中提取纯化。
反应条件:
将糖蛋白于 1X 糖蛋白变性缓冲液（含 0.5% SDS，40mM DTT）中 100℃ 煮沸 10 分钟使其变性，再在加入1% NP-40 的 1X GlycoBuffer 2 反应缓冲液中，37℃ 温育进行反应。热失活:75℃ 10 分钟。
随酶提供的试剂:
10X 糖蛋白变性缓冲液
10X GlycoBuffer 2 缓冲液
10% NP-40
分子量:
36,000 daltons。
质量保证:
无糖苷外切酶污染，无糖苷内切酶 F1、F2和 F3 活性，无蛋白水解活性。
单位定义:
1 单位指 10 μl 的反应体系中，37℃ 条件下 1 小时 从 10 μg 变性 RNase B 中除去超过 95%的碳水化合物所需要的酶量（65 我公司units = 1 IUB milliunit）。
浓度:
500,000 units/ml。
注意事项:
已知 PNGase F 的活性受 SDS 的抑制，所以在反应混合物中必须加入 NP-40。要使天然糖蛋白去糖基化，建议增加酶量并延长温育时间。

除了肽 N-糖苷酶 F（无甘油）,，我公司还供应以下相关产品：



名称：碱性磷酸酶标记链霉亲和素
货号：YT853
规格：0.2ml
本品为碱性磷酸酯酶标记链霉亲和素，可以用于生物素(Biotin)标记的抗体、核酸、蛋白或其它生物素标记分子的检测。具体用途包括Western、ELISA、免疫组化或免疫细胞化学、原位杂交、Southern、Northern、EMSA等。

本AP-Streptavidin用高纯度的Streptavidin和超纯的碱性磷酸酯酶交联而成，确保产生极低的本底和非常高的灵敏度。本产品的浓度为1mg/ml。

Streptavidin的分子量为66kD，可以高度特异性地和生物素(Biotin)结合。Streptavidin和生物素的亲和常数为Kd=10-15M。Streptavidin是一个4聚体蛋白，可以同时结合4个生物素分子。Streptavidin的中文名为链霉亲和素，从Streptomyces adidinii中纯化获得，和鸡蛋清来源的Avidin(亲和素)在空间结构以及与生物素的亲和力方面具有高度的相似性。和Avidin不同的是，Streptavidin是一种非糖基化蛋白，并且基本不带电荷。Avidin的pI=～10.5，在中性pH条件下呈碱性。由于Streptavidin和Avidin相比在中性条件下不带电荷，因此Streptavidin的非特异性结合比Avidin低很多，这样检测时的非特异性背景就低很多。因此目前在生物素检测时通常使用Streptavidin替代Avidin。

碱性磷酸酯酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)常被称作碱性磷酸酶(EC 3.1.3.1)，是一类水解酶，通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去，并生成磷酸根离子和自由的羟基，其去磷酸化作用的底物包括蛋白质、核苷酸和生物碱等，并在碱性条件下最为有效。该酶是一组同功酶的统称。常见的小牛肠碱性磷酸酶(Calf Intestinal Alkaline Phosphatase, CIAP/CIP)被广泛用于二抗等的标记最终用于蛋白和核酸等的检测，例如在Western、ELISA、IHC、ICC、EMSA、Northern、Southern等时，催化BCIP/NBT等显色试剂显色或催化适当的化学发光试剂产生化学发光。本产品标记的就是小牛肠碱性磷酸酶。

本碱性磷酸酯酶标记Streptavidin用于各种常规用途的推荐稀释比例如下，实际实验操作过程中需根据具体情况适当调节碱性磷酸酯酶标记Streptavidin的稀释比例。对于Western，推荐的稀释范围为1:2000-10000。

WB：1:2000-5000
IHC/IC/ISH：1:150-500
ELISA：1:2000-5000
Southern/Northern：1:2000-5000
EMSA：1:2000-5000

储存条件：-20℃，有效期一年。