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279
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长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
100ml|500ml
特别提示:包括哺乳动物细胞蛋白抽提试剂在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:哺乳动物细胞蛋白抽提试剂
产品货号:JN0189
产品规格:100ml|500ml
哺乳动物细胞总蛋白抽提试剂是一种采用温和表面活性剂的细胞裂解试剂,该试剂在低浓度即能溶解细胞膜,不会引起蛋白质变性,抽提的蛋白可用于进一步的分析检测实验或下游的分离纯化。利用本产品抽提效率极高,得到的蛋白量高于反复冻融法或者超声法。本产品对悬浮或贴壁生长的细胞都有很高的抽提效率,无需将贴壁细胞进行消化收集。
除了哺乳动物细胞蛋白抽提试剂,,我公司还供应以下相关产品:
| 货号 | 名称 | 规格 |
| BTN80810 | 一站式SDS-PAGE蛋白电泳套装 | 30次 |
| WE0273 | 微量BCA蛋白定量试剂盒 | 1600次微孔板(50管次) |
| KFS064 | WB抗体清除液(强碱性) | 500ml |
| SY0320 | 10×RIPA裂解液(中)(不含蛋白酶磷酸酶抑制剂) | 100ml |
| SY0337 | 过硫酸* | 5g |
| SY0346 | 考马斯亮蓝R250 | 10g |
| SY0353 | 10×Tris-Glycine-SDS电泳缓冲液 | 500ml |
| SY0390 | 牛纤维蛋白原 | 1g |
| SY0396 | 谷胱甘肽高速纯化树脂(用于GST标签蛋白纯化) | 10ml |
| SY0418 | DEAE弱阴离子高速交换树脂 | 25ml |
| SY0424 | HA Tag多肽 | 5mg |
| QN1084 | 5×蛋白上样缓冲液(含DTT) | 10ml |
| QN1263 | 25%Gluta水溶液 | 10ml |
| HR8060 | 植物核蛋白提取试剂盒(非酶法,pμll-down适用) | 50T/100T |
| HR8066 | 酵母蛋白提取试剂盒(无去垢剂) | 50T/100T |
| HR8073 | 昆虫蛋白提取试剂盒(pull-down、co-IP等) | 50T/100T |
| HR8095 | 亮抑酶肽 Leupeptin | 5mg |
| HR0347 | 封闭液(Western) | 100ml |
| HR0387 | His标签蛋白纯化填料(带柱子) | 10ml |
| HR8148 | 3.5KD透析袋(φ28mm) | 1卷,5M |
| GL1488 | 双缩脲总蛋白试剂 | 100ml|500ml |
| GL1563 | 丽春红S染色液(10×Ponceau S) | 10ml|50ml |
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文献和实验在哺乳动物细胞中进行RNA干扰:设计,实验和分析siRNA效应
对siRNA介导的降解更为敏感。候选序列在人类基因组数据库中Blast以避免和其他基因的同源性,最后每个目标靶基因选出对应4个siRNAs。 siRNA合成:分别用化学合成的方法和试剂盒(酶法)制备siRNAs并用常规方法定量。 转染:哺乳动物细胞(Hela)在不含抗生素的完全培养基中生长至 40-70%汇片,分别将每个siRNAs(分别以不同的浓度),转染试剂和Opti-MEM (Invitrogen)混合,室温下孵育15—20分钟,加入siRNAs转染混合物并适当调整培养基的体积。温育48
型的蛋白,或进行高解析度的结构分析,愈来愈多的实验组选择哺乳类表达系统来生产融合蛋白。其原因为哺乳动物细胞生产出的重组蛋白与人类蛋白十分相似,有较完整的蛋白折叠、组合及翻译后修饰[3]。因此,愈来愈多科学家们更加关注于—如何从哺乳类细胞中高效的纯化目标蛋白。1 亲和标签的选择首先,需考虑选择合适的亲和标签。常用于哺乳动物表达系统的亲和标签有 His-tag、FLAG-tag、GST-tag及 Strep-tag® 等[4-12],整理于下表:(点击放大查看)这些亲和标签在使用上各有千秋。使用
将制备好的siRNA、siRNA 表达载体或表达框架转导至真核细胞中的方法主要有以下几种:磷酸钙共沉淀;电穿孔法;DEAE-葡聚糖和polybrene;机械法;阳离子脂质体试剂。目前用的最多的是阳离子脂质体法。
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