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负80度
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3年
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psPAX2-D64V慢病毒包装质粒
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100
- 供应商:
上海柯雷生物
- 规格:
20ul
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文献和实验一、材料和试剂 1. Hairpin-pLKO.1vector(OpenBiosystems) 2. Packagingvectors:第二代包装质粒包含gag,pol,和rev基因(pCMV-dR8.91或pCMV-dR8.74psPAX2)和包被质粒(pMD2.G)(Addgene) 3. 脂质体2000(Invitrogen) 4.OptiMEM无血清培养基(Invitrogen) 5. 293T包装细胞(ATCC)
基因编辑再次升级!领域大牛刘如谦 Cell 发文开发新工具,可安全高效进行体内基因编辑
选获得 v3.4 BE-eVLPs 系统。 最后,研究人员发现,不同包装质粒间的化学计量比也会影响 BE-eVLP 系统的编辑效果。为了调节这种化学计量学,他们改变了 gag-3xNES-ABE8e 与转染 VLP 的野生型 MMLV gag-pro-pol 质粒的比例。结果发现 gag-pro-pol 质粒与 gag-3XNES-ABE8e 质粒的摩尔比例为 1:3 时获得最佳的碱基编辑效率,并命名为第四代 BE-eVLPs 系统(v4 BE-eVLPs)。 随后的实验也证明,v
质粒上, 即一个表达gag 和po l、另一个表达env。根据这个原理,N aldin i 和Kaf ri 等构建了三质粒表达系统[ 1, 4 ]。 1.2 三质粒表达系统 三质粒表达系统包括包装质粒、包 膜蛋白 质粒和转移质粒。其中包装质粒在CMV 启动子的控制下, 表达H IV 21 复制所需的全部反式激活蛋白, 但不产生病毒包 膜蛋白 及辅助蛋白vpu; 包膜蛋白质粒编码水泡性口炎病毒G 蛋白(V SV 2G) , 应用 V SV
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