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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
62
- 英文名:
T5 Exonuclease
- 保质期:
3年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
1000U|10000U
特别提示:包括T5核酸外切酶在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:T5核酸外切酶
英文名称:T5 Exonuclease
产品货号:MT0084
产品规格:1000U|10000U
T5核酸外切酶沿5"→3"方向降解DNA,它可降解双链DNA、单链DNA和缺刻的质粒DNA。它既能从5"-末端起始降解DNA,也能从线性或环状双链DNA的切刻或缺口处起始降解DNA,但不能降解超螺旋双链DNA。基于以上特性,T5核酸外切酶可应用于Gibson组装。
产品组成:
| 组分 | 规格 |
| T5 Exonuclease(10U/μl) | 100μl |
| 10×T5 Exo Buffer | 1ml |
保存条件:-20℃,可保存3年。
单位定义:1单位指在50μl反应体系,37℃条件下,30分钟内能从双链DNA底物上催化产生1nmol的酸可溶性脱氧核糖核苷酸所需要的酶量
使用注意事项:
1.1×T5 Exo Buffer:50mM KAc,20mM Tris-Ac pH 7.9,10mM Mg(Ac)2,1mM DTT。该酶在PCR Buffer中也具有活性。
2.该酶的最佳反应温度为37℃,在50℃也具有一定活性,因此可用于Gibson组装。
操作方法:
1.建立如下反应体系:
模板DNA————————1μg
10×T5 Exo Buffer———5μl
T5 Exonuclease————-1μl
ddH2O—————————up to 50μl
2.37℃,30分钟。
3.加入EDTA至总浓度为11mM,终止反应。
核酸酶选择指南:
| 货号 | 酶 | 消化活性 | 底物 | 产物 | 用途 |
| MT0068 | Benzonase核酸酶 | 核酸内切酶活性 | 任何形式的DNA/RNA | 3-5bp寡核苷酸 | 消化任何形式的核酸; 去除蛋白样品中的核酸污染。 |
| MT0084 | T5核酸外切酶 | 5"-3"核酸外切酶活性 | 单链和双链DNA | dNMP至6寡核聚体 | DNA消化和Gibson组装 |
| MT0085 | T7核酸外切酶 | 5"-3"核酸外切酶活性 | 双链DNA | ssDNA和二核苷酸 | 消化双链DNA |
| MT0086 | λ核酸外切酶 | 5"-3"核酸外切酶活性 | 单链和双链DNA | ssDNA和dNMP | 消化双链DNA |
| MT0087 | 核酸外切酶I | 3"-5"单链外切酶活性 | 单链DNA | dNMP、二核苷 | PCR扩增后降解消化引物 |
| MT0088 | 热敏双链DNA核酸酶) | 双链DNA核酸酶活性 | 双链DNA | 2-8bp寡核苷酸 | 去除RNA样品中的DNA污染。 |
| MT0089 | Rnase H | 核糖核酸内切酶活性 | 杂交到DNA链上的RNA | ssDNA和2-8bp的 5"磷酸寡核苷酸 |
除去杂交到poly(dT)上的mRNA poly(A); 在cDNA第二链合成时除去mRNA。 |
| MT0090 | Dnase I | 核酸内切酶活性 | 单链和双链DNA | 2-3bp寡核苷酸 | 蛋白样品中DNA的去除 |
| MT0091 | Rnase A | 核酸内切酶活性 | 单链RNA | 3"-核苷磷酸 | 质粒或基因组中RNA污染的去除 |
| MT0092 | DNA损伤修复酶 | 核酸外切酶活性 | DNA | DNA修复 |
除了T5核酸外切酶,,我公司还供应以下相关产品:
| 货号 | 名称 | 规格 |
| BTN131196 | Therminator II DNA聚合酶 | 100U |
| BTN130649 | 尿嘧啶-DNA糖基化酶(人单链选择性单功能)(hSMUG1) | 500U |
| YT410 | SP6 RNA聚合酶 | 500U |
| SV0061 | AscI RE-Mix限制性内切酶 | 50次 |
| SV0073 | AvaII限制性内切酶 | 10KU|10KU|2KU|1KU |
| SV0089 | BamHI-HF限制性内切酶 | 50KU|50KU|10KU|10KU|5KU |
| SV0100 | BbsI限制性内切酶 | 1500U|300U|150U |
| SV0153 | BsaAI限制性内切酶 | 2500U|500U |
| SV0184 | BsiWI限制性内切酶 | 1500U|300U|150U |
| SV0236 | BssHII限制性内切酶 | 2500U|2500U|500U|250U |
| SV0271 | BstZ17I限制性内切酶 | 5KU|1KU |
| SV0303 | DpnI限制性内切酶 | 5KU|1KU|500U |
| SV0588 | PflMI限制性内切酶 | 5KU|1KU|500U |
| SV0593 | PluTI限制性内切酶 | 2500U|500U |
| SV0610 | PspOMI限制性内切酶 | 7500U|1500U |
| SV0619 | PstI-HF限制性内切酶 | 50KU|50KU|10KU|10KU|5KU |
| SV0723 | SphI-HF限制性内切酶 | 2500U|2500U|500U|250U |
| SV0740 | StyI限制性内切酶 | 15KU|3KU|1500U |
| SV0760 | TspMI限制性内切酶 | 1KU|200U |
| SV0943 | Bst DNA 聚合酶,全长 | 2500U|500U |
| SV1074 | BAL-31 核酸酶 | 250U|50U |
| SV1082 | 核酸外切酶 V (RecBCD) | 5KU|1KU |
| SV1153 | dam 甲基转移酶 | 2500U|500U |
| SV1343 | T3 RNA 聚合酶 | 5KU |
| SV1366 | RNase HII | 1250U|250U |
| JN0073 | 核酸内切酶IV | 100U×5 |
| JN0078 | Cre重组酶 | 25U×5 |
| JN0083 | 精氨酸甲基转移酶7 | 10μg |
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文献和实验在核酸水解酶中,是具有从分子链的末端顺次水解磷酸二酯键而生成单核苷酸作用的酶,与核酸内切酶相对应。可大致分为水解磷酸二酯键的 3′端生成 5′ -单核苷酸的酶,及水解 5′端生成 3′ -单核苷酸的酶。前者有蛇毒磷酸二酯酶及大肠杆菌核酸外切酶Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ等;后者有脾脏磷酸二酯酶、嗜酸乳杆菌( Lac-tobacillus acidophilus)核酸酶。这些酶中还可以区别出从分子链的 3′末端或 5′末端开始切断和对单链 DNA或双链 DNA具有特异作用的酶。可利用这些酶水解
脾脏核酸外切酶spleen exonuclease,spleenphosphodiesterase
亦称脾脏磷酸二酯酶(spleen phosphodieste- rase)。系将具有 5′ -OH末端的 DNA和 RNA,从 5′末端向 3′方向不断使 3′ -核苷酸游离分解的酶。 EC3. 1. 16. 1。常从牛脾脏提纯的此种酶。高分子 DNA不易水解,但用 DNaseⅡ或普氏微球菌( Micrococ-cus pyogenes)核酸酶处理,则可以完全水解。对碱基序列无特异性,但在 5′末端有磷酸单酯基则不水解。反应不需要 Mg2 ,但最适 pH在有 2× 10
率。 核酸酶污染的过夜鉴定 所有的限制性内切酶 与1μg 底物DNA在50μl反应体系中,采用推荐的NEBuffer温育过夜。比较酶切1小时的特征带型和过夜酶切的带型。如果两种情况下带型均明显、没有改变,则说明测试的酶中不存在非特异性的DNA酶。我们报道了可以温育过夜的最大酶单位数。 核酸外切酶污染鉴定 所有的限制性内切酶与1μg 单双链混合的、3H标记的E.coli DNA (200,000 cpm/μg)在50μl反应体系中
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