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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 细胞类型:
科研
- 品系:
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- 组织来源:
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- 物种来源:
鼠/人/其它
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 器官来源:
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- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 年限:
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- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 英文名:
V79
中国仓鼠肺细胞_V79培养物污染往往是细胞培养实验室最常遇到的问题,有时会带来十分严重的后果。污染物主要分为两类,一类是化学污染物,另一类是生物污染物。尽管无法彻底消除污染,但是可以通过充分了解污染源以及采用良好的无菌技术,降低污染发生的频率和严重程度。
传授细胞培养基本方法
细胞复苏步骤
一、所需仪器:
1)离心机
2)生物安全柜
3)电动移液器
4)CO2培养箱
5)倒置显微镜
6)液氮罐
7)恒温水浴锅
二、所需试剂:
1)胎牛血清(FBS)
2)无菌1×PBS pH=7.2
3)完全培养基
三、所需耗材:
1)离心管(15ml、50ml)
2)T-25细胞培养瓶
3)一次性无菌移液管(2ml、5ml、10ml)
四、操作步骤:
1.将恒温水浴锅中的水预热到37℃;
2.从液氮罐中取出要复苏的细胞,尽快转入恒温水浴锅中复温,工程中需要不断震荡冻存管以提高复温速率;
3.将融化了的冻存管中的用移液管转入一直装有5ml完全培养基的15ml离心管中,充分混匀后,300g离心5min;
离心完成后弃去上清,用1ml完全培养基重悬细胞后,转入T-25细胞培养中,再加完全培养基4ml,之后转入CO2培养箱中培养静置。
细胞冻存步骤
一、所需仪器:
1)-86℃超低温冰箱
2)离心机
3)生物安全柜
4)电动移液器
5)CO2培养箱
6)倒置显微镜
7)液氮罐
二、所需试剂:
1)胎牛血清(FBS)
2)细胞培养级DMSO
3)冻存液:80%FBS+20%DMSO
4)无菌1×PBS pH=7.2
5)消化液:0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA isopropanol
三、所需耗材:
1)离心管(15ml、50ml)
2)T-25细胞培养瓶
3)一次性无菌移液管(2ml、5ml、10ml)
4)1.8ml冻存管
5)程序降温盒
四、操作步骤:
- 将需要那冻存的细胞从CO2培养箱中取出,在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,吸弃瓶内的培养基;
- 向培养内加入无菌1×PBS 3ml,之后水平放置培养瓶,旋转震荡培养瓶,使PBS能够浸润到培养平面上所都的面积,吸弃PBS;
- 重复步骤2一次,之后向瓶内加入消化液1ml,轻微震荡后放入37℃CO2培养箱中孵育2-4min;
- 孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起,如还有部分细胞为消化下来,可在生物安全柜内用移液管吸起消化液,吹打培养平面;
- 向消化下细胞的培养瓶中加入1ml含血清的完全培养基终止消化,然后将培养瓶中的液体转入15ml离心管中,300g离心5min;
- 离心完成后,弃上清,用0.5mlFBS重悬细胞,再加入0.5ml冻存液,用移液管充分混匀,之后转入1.8ml冻存管中;
- 将冻存管转入填充满isopropanol的程序降温盒中,之后转入-80℃冰箱中过夜降温;
- 第二天,取出降温完成的序降温盒中的冻存管,尽快转入液氮罐中保存。
产品图片:
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文献和实验体外哺乳类细胞(V79/HGPRT)基因突变试验- 中华仓鼠肺细胞染色体突变实验
受试物的致突变性。 3 材料和试剂 3.1 细胞:使用中国仓鼠肺(v79)细胞株。为了减少自发突变率,正式实验前先将野生型细胞群体中存在的自发HGPRT座位突变体选择性杀灭,方法是将野生型细胞接种于含次黄嘌呤及胸腺嘧啶,氨甲氨甲喋呤,甘氨酸的MEM培养液中培养1周,然后重新接种于MEM培养液中。 3.2 培养液:采用MEM(Eagle)基础培养液或DMEM培养液,补以10%小牛血清及适量抗菌素(青霉素,链霉素)。 3.3 磷酸缓冲液(无钙、镁PBS) 磷酸二氢钾
细胞 2.大鼠类 BRL 肝细胞 LW-3 肝细胞 BRL 3A 肝细胞 NRK 肾细胞 L-6TG 肌母细胞 3.仓鼠类 BHK 幼仓鼠肾 V79 中国仓鼠肺细胞 CHL 中国仓鼠肺细胞 CHO 中国仓鼠卵巢细胞 R1610 中国仓鼠体细胞 *CHO/dhFr- 二氢叶酸还原酶缺陷型CHO 4.人类 2BS 胚肺 XJH B淋巴细胞 HLF 胚肺 L-02 肝细胞
体外哺乳类细胞基因突变(HGPRT)试验原理及注意事项 In vitro Mammalian Cell Gene Mutation Test 【试验原理】 体外哺乳动物细胞基因突变试验是利用培养的哺乳动物细胞作指示生物的体外遗传毒理学试验,可用于检测有化学物质诱导的基因突变,适用的细胞系包括小鼠淋巴瘤细胞(L5178Y),中国仓鼠肺细胞(V79),中国仓鼠卵巢细胞(CHO),人类淋巴母细胞(TK6)等。这些细胞系,常用的遗传学终点是检测胸苷激酶(TK)图标,次黄嘌呤鸟嘌呤转磷酸
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