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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 检测范围:
详询
- 检测方法:
ELISA
- 应用:
科研实验
- 适应物种:
人
- 标记物:
详见说明书
- 样本:
血清、血浆、细胞及相关液体
- 规格:
48T/96T
烜雅生物以强大的专业背景、优质的客户服务,在市场竞争日益激烈的今天不断拼搏,开拓进取,与各界朋友携手共创美好未来。本司不仅有自己研发生产试剂盒,还代理国内外各大品牌试剂,细胞,标准品。欢迎新老顾客前来垂询。
人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)ELISA试剂盒 (酶联免疫吸附试验法)使用说明书:请向我司客服索取。
中文名称:人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)ELISA试剂盒
规 格:48T/96T
方 法:ELISA
物 种:人
价 格:敬请客户与我司取得联系获取实时报价
[实验原理]
人抗人类免疫缺陷病毒抗体(HIV)ELISA试剂盒 采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被指标捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
[需要而未提供的试剂和器材]
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
4.蒸馏水或去离子水
样品处理方法:
血液样本
有些生理因素,如吸烟、进食、运动、情绪波动、妊娠、体位等均可影响血液中某些成分的变化,有些甚至还有昼夜变化。因此血液标本的采集应尽量避免生理因素干扰,以条件一致为宜,如无法避免,应在标本上注明该因素。
粪便样本
粪便标本的检测对判断消化系统疾病有重要参考价值。采集时要求用干净的竹签选取含有粘液、脓血等异常病变成分的粪便,对外观无异常的粪便须从表面、深处及粪端多处取材。找寄生虫虫体及作虫卵计数应收集24小时粪便。查痢疾阿米巴滋养体应于排便后立即检查,从有脓血和稀软处取材,保温送检。查日本血吸虫虫卵时应取粘液、脓血部分,孵化毛蚴时至少留取30g粪便,且需尽快处理。检查蛲虫卵须用透明薄膜拭子于晚12时或清晨排便前自肛门周围皱襞处拭取并立即镜检。隐血试验(化学法),试验前3日禁食肉类及含动物血食物并禁服铁剂,维生素C等。所有粪便标本采集后1小时内应检查完毕,以防止有形成分受消化酶及pH的破坏,来不及检测的,应及时用PBS进行缓冲处理,离心去上清保存。
ELISA的样本实验准备
在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行
检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,最好-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。
液体类标本: 包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等
培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
上海烜雅生物ELISA试剂盒牛奶样本处理方法:
方法1:取牛奶10ml入离心管,加入10ml EAC,超声震荡30min。然后4000g离心10min(如两相之间出现乳化层,则将样品瓶放在80℃的水浴中约5min,再离心)移取1ml EAC层至另外试管中,60℃氮气流下蒸干,残留物用缓冲液2ml缓冲后备用,前处理过程约需2小时。
方法2 :取10ml牛奶10℃3500G离心10MIN,祛除上层脂肪,ELISA试剂盒牛奶样本处理时,取5ml脱脂奶粉加入150微升17.2%,出现沉淀,漩涡混合。然后加入150微升53.5%硫酸锌。再次漩涡混合。15摄氏度3500g离心10分钟,取上层清液用缓冲液1:2稀释待用,前处理过程所需1小时。
★★★★★希望这些样本处理的方法可以帮到您★★★★★
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文献和实验有不少厂家在生产这类抗-HIV试剂盒。笔者在献血者血液标本的日常初、复检中,使用了二类各1家试剂,发现1例标本明显的一阴一阳结果,后经稀释法、二类多家试剂、抗-HIV确认试验,证实为ELISA“一步法”引起的假阴性结果,报告如下。 1 材料与方法 1.1 标本来源 标本采自本血液中心无偿献血者,采全血200ml于ACD-B三联袋T-200ml(上海市血液中心生产,批号0301406-14)内,并分离新鲜血浆135ml。 1.2 试剂 抗-HIV ELISA试剂盒(厦门新创公司,批号
于阴性反应。如抗原为高纯度的,可直接包被固相。如抗原中会有干扰物质,直接包被不易成功,可采用捕获包被法,即先包被与固相抗原相应的抗体,然后加入抗原,形成固相抗原。洗涤除去抗原中的杂质,然后再加标本和酶标抗体进行竞争结合反应。竞争法测抗体有多种模式,可将标本和酶标抗体与固相抗原竞争结合,抗HBc ELISA一般采用此法。另一种模式为将标本与抗原一起加入到固相抗体中进行竞争结合,洗涤后再加入酶标抗体,与结合在固相上的抗原反应。抗HBe的检测一般采用此方法。 5.竞争法测抗原 小分子抗原或半抗原因缺乏
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