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- Co-IP, pull-down蛋白质样品质谱鉴定
- 上海
- 2025年07月15日
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- 文献和实验
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- 提供商：
上海普赛生物科技有限公司
- 服务名称：
蛋白质样品质谱（LC-MS）鉴定
- 规格：
/样品
- 利用LC-MS/MS实现对未知样品中蛋白质的定性分析，确定样品中具体有哪些蛋白质，从而便于研究者发现和筛选目标分子。
- 适用于Co-IP、pull-down（DNA、RNA、蛋白质）等方法纯化的蛋白质复合物，可以直接以液体的方式进行后续LC-MS分析。
- 适用SDS-PAGE分离的Co-IP、pull-down（DNA、RNA、蛋白质）等方法纯化的蛋白质复合物，切割胶条，进行胶内酶解，最后进行LC-MS/MS分析。
- 其他复杂度低的蛋白质样品（溶液状态、考染/银染胶条等）。
- 服务费用依据客户所选MS仪器类型及测试时间而异。我们的MS仪器有Orbitrap Fusion Lumos、Orbitrap Fusion、Q-Exactive、Q-Exactive HF等。对于胶条样品，建议的LC-MS测试时间为1-1.5小时/样品；对于溶液样品，建议的LC-MS测试时间为2-3小时/样品。
- 实验完成，我方提供完整的英文实验流程，可直接用于要发表的学术文章撰写。
- 更多信息，请访问我们的网站：www.psi-bioscience.com。
（一）LC-MS系统及MS数据采集：
（二）数据库检索（database search）完成蛋白的鉴定：
（三）MS原始文件展示：
（四）MS鉴定结果展示：
四、LC-MS蛋白质鉴定视频教程：
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文献和实验基于质谱的蛋白质鉴定，第6节：MALDI-TOF-MS蛋白和肽样品的制备
。通过这一改进，可以实现亚摩尔级别蛋白样品的质谱鉴定。目前，与寡核苷酸检测类似，如果在疏水环境中创建一个小的亲水位点，以避免肽基质在疏水板表面的随机结晶。理想条件下，样品会在这个小亲水位点处结晶，从而提高整体测量的灵敏度。处理少量样品时，另一个引起注意的问题是角蛋白的污染，这种蛋白主要来自人类或绵羊的汗液。只需要采取简单的预防措施，例如使用新鲜制作的缓冲液和溶液（凝胶溶液，电泳缓冲液染色溶液，消化缓冲液）以及限制凝胶在空气中的暴露时间（例如，在染色过程中），即可避免该问题。 在MALDI-MS方法中，蛋白质
1. 前言 蛋白质组学分析是一个多步骤的过程，通常涉及蛋白质的提取、分级、分离和质谱鉴定。分离蛋白质的首选是二维电泳。胶内消化、纯化的蛋白可以利用 MS 或 MS/MS ( 串联质谱）得到的肽段进行分析、鉴定。如果已知物种的基因全序列，则通常使用基质辅助激光解吸质谱法电离飞行时间（MALDI- TOF) 的 MS 光谱技术来进行分析。它是一种高通量鉴定蛋白质的方法，而且也不需要纯化肽段。另外，尽管 MS/MS 分析比较费时，但可以在没有数据库（从头测序）情况下识别单个肽段。理论上，利用
被定位，接下来的蛋白质磷酸化程度的相对定量分析可通过以下介绍的实验方法中的两个不同的实 验步骤来完成，在此需要提醒大家的是，这里所介绍的成功应用以质谱为基础的磷酸肽鉴定的方法，仅限于已经完成基因组测序的植物物种的蛋白质磷酸化鉴定和分析。2. 材料 ( 1 ) 分别配制新鲜的 25 mmol/L NH4HCO3 和 10 mmol/L NaF 溶液。 ( 2 ) 二硫苏糖醇（DTT ) 。 ( 3 ) 碘代乙酰胺，它在溶液中不稳定，因此要用前现配
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