T/G HAVSMC 人主动脉血管平滑肌细胞

本公司提供的细胞（培养基：89%1640+10%FBS+1%双抗）详细说明书及细胞培养操作指南欢迎联系我们。 发货方式： 复苏后发货：我们复苏细胞后发货，货期一周左右，免运费。（气温较好建议复苏后发货） 冻存发货(干冰运输）：需额外增加干冰运费，选择干冰运输的我们发两管细胞，为了保证客户接种可靠性多发一管。（气温低于0℃须冻存发货） 细胞发货采取专业的运输包装，并选择最快捷的运输方式（顺丰速运或其他空运快递） 本公司细胞引种来源：ATCC、DSMZ、ECACC、武大细胞库、上海生化细胞所、中国科学院典型培养物保藏委员会等 细胞在发货前进行质检： 1、细胞存种的活性检测 2、细菌、真菌、霉菌污染物镜检 3、衣原体、支原体检测（荧光法、培养法等） 产品质量保证及售后： 1、 细胞为三代以内，活体。运输过程中细胞出现污染和状态不好，我们完全免费重新发货。 2、 实验过程中若确定是客户问题，客户仅需支付物流和耗材费用，我们可重新发货。其他根据情况灵活处理。 3、 产品使用过程中，华拓生物可提供技术上的指导。 1.血清中可能出现的沉淀物是什么？ 基于多年的实验研究，用于细胞培养的胎牛血清以及其它血清中可能会存在以下种类的沉淀物：（1）纤维蛋白，它是经常出现的较大的沉淀物，可以达到 1-2mm，可以用肉眼观察到。 因为血清都是在低温下进行收集和快速处理的，一些纤维蛋白原（可溶性的形成絮状纤维蛋白 的前体）在处理过程中仍然处于溶解状态，当经过最后的过滤分装后，就会在瓶中凝结出现纤维蛋白沉淀。（2）磷酸钙，它也是常见的一种沉淀物，通常会使血清出现浑浊，并且在 37℃ 培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点，这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动，因此经常被误认为是微生物污染。（3）胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质。他们也是血清中出现沉淀物的常见原因。 2.血清中的沉淀物对细胞培养有什么影响？ （1）细胞生长。我们的试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养，我们的客户以及其它血清生产商也证明了这一点。 （2）过滤。如果血清中出现大量的沉淀物，血清将很难过滤。一般说来，因为在血清生产时最后已经经过 100nm 或者 40nm 的过滤处理，并且经过了严格的无菌检测，因此不推荐再过滤用于细胞培养的血清。在实验室中没有必要再过滤处理血清，在大觃模的细胞培养中往往将 血清直接加到培养基中一起过滤。 （3）污染。磷酸钙往往被误认为微生物污染而引起争端，研究者可能会在血清中观察到一些絮状的沉淀，因此就会比较警觉的去做无菌试验，将血清放在培养箱中培养几天，结果可能会观察到更多的絮状沉淀，因此就断定血清被污染了。并且当研究者将血清样品放在倒置显微镜下观察时往往可以看到一些可以运动的小黑点，因此就更加确认是血清被污染了。于是，研究者就会花费更多的时间和精力来和生产商确认，但最终确定血清没有被污染而只是沉淀。为了避免这些问题的发生，我们建议不要直接将血清放在培养箱中培养观察是否有菌，而是将血清加到琼脂板上进行培养以观察是否有细菌生长。另外，也可以进行革兰氏染色，在油镜下观察，以确认是否有污染。 3.如何避免血清中沉淀物的出现？ 首先要注意正确的血清解冻步骤，而且溶解过程中一定要每隔一段时间均匀而缓慢的摇动血清。我们已经发现在下列情况下沉淀物可能增加，使用中应该尽量避免： （1）热灭活血清； （2）在 37℃下培养血清； （3）反复冻融； （4）γ射线照射； （5）长期储存在 2-8℃； （6）在室温下放置时间过长 4.如何去除血清中的沉淀？ 如想去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装到无菌离心管中，以 400g 离心，上清液即可直接加入到培养基内一起过滤。注意：不要以过滤的方式去除这些絮状沉淀物，因为这可能阻塞滤膜。 5.冷冻管应如何解冻？ 取出冷冻管后，须立即放入 37°C 水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在 1 分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管的爆裂。 6.细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除 DMSO？ 除少数特别注明对 DMSO 敏感的细胞外，绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞），在解冻之后，应直接放入含有 10-15ml 新鲜培养基的培养角瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附的问题。