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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
100
- 细胞类型:
科研
- 品系:
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- 组织来源:
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- 物种来源:
鼠/人/其它
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 器官来源:
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- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 年限:
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- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 英文名:
HeLa229
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ATCC货号:人宫颈癌细胞(HPV-18 永生化细胞)_HeLa229
1. 液体培养基的保存是冷藏好?还是冷冻好?
要冷藏!!因为液体培养基经冷冻后再经溶化时,其溶液的pH值会发生改变,溶液往往变碱,某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中,通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。
2.液体培养基中谷氨酰胺的作用,及使用方法。
几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求,细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置-20 ◦C冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4 ◦C 冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷氨酰胺。基础医学细胞中心在其服务项目中配制分装了高浓度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支)。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml完全培养基中,其终浓度为2mM/ml培养基。包装为粉红色,-24◦C保存。
3. 培养用液pH对细胞生长的影响
由于,大多数细胞适宜pH为7.2~7.4,偏离此范围对细胞将产生有害的影响。各种细胞对pH的要求也不完全相同,原代培养细胞一般对pH变动耐受差,无限细胞系耐受力强。
但总体来说,细胞耐酸性比耐碱性强一些,偏酸环境中更利于细胞生长。因此,我们在配制培养用液时,可把液体的pH稍微调得偏酸一些。液体在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时,溶液的pH还会向上浮动0.2左右。
4.细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗?
不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0 , 温度 37 oC 其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前,一定要用D-Hanks液或PBS液反复冲洗细胞培养瓶,以便于将含血清的培养基冲洗干净,这样就能大大提高消化液的消化能力。本中心通常使用的消化液浓度为:
(1)0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA;
(2)0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA。
(3)0.25% 胰蛋白酶
溶液pH8.0~9.0;使用D-Hank液配制。
多数细胞传代消化可使用0.05%胰蛋白酶+0.02%EDTA这种消化液。
购买上海烜雅生物细胞注意事项(烜雅生物)发布
一、客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;
收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。
二、如为贴壁细胞,请在显微镜下观察细胞密度:
1. 未超过80%汇合度时,用75%酒精(建议配置75%酒精的水也是灭菌超纯水,喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作;然后打开盖子,先用枪头把培养基吸出10ml左右,放在离心管里,然后瓶口过火(严禁直接倾倒),这样可以保证不污染,再用10ml的移液管,将剩余的培液全部吸出,放于离心管中,培养瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培养16hr(时间根据细胞生长情况调整)之后,传代或者冻存。
2. 超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。具体步骤如下:
1) 弃去培养液,用3ml PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来;
3) 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中,按要求分瓶。
三、如为悬浮细胞,吸出培养液,1000转/分钟离心5分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。
注意:换液时一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造成生长不好。
四、售后服务政策
细胞污染问题,请在收到产品48小时内,给我们提出真实的实验结果;细胞活性问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果,我们调查核实后予免费调换,不收取任何费用。
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文献和实验HPV 并不是宫颈癌唯一的「元凶」?这种微生物化身「帮凶」,共同促进癌症发生
家推测沙眼衣原体和 HPV 合并感染是驱动恶性组织形成的重要因素,但其背后潜在的机制仍然是未知的。 病毒可以在肿瘤中留下可检测的 DNA 片段,在 90% 以上的宫颈癌中可以检测到病毒的 DNA 片段。但与病毒不同,衣原体很少在癌细胞中留下可检测的元素,因此其诱发癌变的具体机理难以厘清。 在该研究中,研究人员开发了一种模拟 HPV 和沙眼衣原体共感染的宫颈癌类器官模型,并阐明了 HPV 和沙眼衣原体合并感染后,会导致宿主独特的细胞重编程。该研究将衣原体感染与宫颈癌的发展联系起来,进一步揭示
相比,增殖依然异常迅速。此细胞株被用作"model cancer cells”来研究细胞信号传导(cellular signal transduction)。HeLa细胞株是由正常子宫颈细胞被一种人类乳突状瘤病毒(Human Papillomavirus 18 或HPV18)转型成癌细胞的,而且和正常子宫颈细胞有许多不同。目前已经证实HeLa细胞株难以控制。此细胞株有时会污染同一实验室的其他细胞培养环境(cell culture),进而影响生物研究。由于研究人员很少检查已确立的细胞株的本质和纯粹度
1951年由 G. O. Gey等从人子宫颈癌组织分离出来的株细胞。 HeLa是原患者姓氏的缩写。这种细胞是现有来自人体的组织培养中最早的分离细胞,在世界各地的研究室继续培养,广泛应用于各种研究。它们在体外容易增殖形成上皮性的细胞排列。染色体数频率分布式为 78— 80,移植于人体皮下则形成肿瘤,在豚鼠的眼前房,大鼠的颊囊以及经 X射线皮质酮处理的小鼠可作异种移植,由此可以认为仍保持着癌的性状。广泛被用作分析细胞营养要求、细胞增殖和各种细胞化学的研究材料。易从细胞群落作无性
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