大额牛肺细胞；BFR-L1图片

大额牛肺细胞；BFR-L1图片产品基本信息:
细胞名称 大额牛肺细胞；BFR-L1图片
形态特性 成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞系来源于一雄性新生大额牛的肺组织。2000年由中国科学院昆明细胞库建立。
培养条件 M-199：
with Earle＇s Balanced Salts Solution (EBSS) 胎牛血清 15%  
传代方法 1：
2传代；3-4天一次  
传代情况 P3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS　
支原体检测 荧光法（-）　
STR -
同工酶
染色体
使用权限 B类
大额牛肺细胞；BFR-L1图片培养方法：
收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况，如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，留10ml培养液继续培养。
培养实验又要开始了，科研工作者又该忙碌了，大家可能都在寻找适合自己的细胞，不用急，我们帮您掌舵，让您满意！
传代方法：细胞完全汇合时，倒掉旧液，加入消化液（0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA）2ml消化，显微镜下观察细胞完全脱离瓶壁分离成单个细胞后弃掉胰酶，加培养基混匀分瓶，T25瓶中加培养基至6-8ml，T75瓶加培养基至20ml，37℃，5%CO2孵箱培养。
大额牛肺细胞；BFR-L1图片注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等，确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题，责任由客户自行承担。
3.   用 75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常， 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活 力，请拍下 照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4.   静置细胞贴壁后，请将细胞瓶内的培养基倒出，留 6~8mL 维持细胞正常培养，待细 胞汇 合度  80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件。
6.   建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和 Procell 技术 部 沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联 系，告知细胞的具体情况，以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。

大额牛肺细胞；BFR-L1图片培养操作
1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。      
1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。  
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；
1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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大额牛肺细胞；BFR-L1图片7（Z），10（Z），13（Z），16（Z），19（Z）-N-（2-hydroxyethyl）-Docosapentaenamide （500 ug）N-（2-hydroxyethyl）-7Z，10Z，13Z，16Z，19Z-docosapentaenamide； 7（Z），10（Z），13（Z），16（Z），19（Z）-N-（2-hydroxyethyl）-Docosapentaenamide
2-Methoxymethcathinone （hydrochloride） （10 mg）1-（2-methoxyphenyl）-2-（methylamino）propan-1-one， monohydrochloride； 2-MeOMC； 2-Methoxymethcathinone （hydrochloride）
Meconin （5 mg）6，7-dimethoxy-1（3H）-isobenzofuranone； NSC 35547|Opianyl； Meconin
17-keto-4（Z），7（Z），10（Z），13（Z），15（E），19（Z）-Docosahexaenoic Acid （250 ug）4Z，7Z，10Z，13Z，15E，19Z-17-keto-docosapentaenoic acid； 17-keto-4（Z），7（Z），10（Z），13（Z），15（E），19（Z）-DHA； 17-keto-4（Z），7（Z），10（Z），13（Z），15（E），19（Z）-Docosahexaenoic Acid
2-Acetyl-5-tetrahydroxybutyl Imidazole （10 mg）1-[5-[（1R，2S，3R）-1，2，3，4-tetrahydroxybutyl]-1H-imidazol-2-yl]-ethanone； 2-ATHBI|THI|2-Acetyl-4-tetrahydroxybutyl Imidazole； 2-Acetyl-5-tetrahydroxybutyl Imidazole
5-（（3-chlorophenyl）amino）benzo[c][2，6]naphthyridine-8-carboxylic acid； SilmitasertibCX-4945
5-（Thien-3-yl）-3-aminothiophene-2-carboxamideSC-514
4-（4-Chlorophenyl）pipeazin-1-yl）（morpholino）methanoneAKR1C3 Inhibitor III
DoripenemDoribax|Finibax|S 4661； 3-[[（3S,5S）-5S-[[（aminosulfonyl）amino]methyl]-3-pyrrolidinyl]thio]-6S-[（1R）-1-hydroxyethyl]-4R-methyl-7-oxo-1-azabicyclo[3.2.0]hept-2-ene-2-carboxylic acid
1-Palmitoyl-2-lauroyl-sn-glycero-3-PC （250 mg）1-palmitoyl-2-lauroyl-sn-glycero-3-phosphatidylcholine； 1-Palmitoyl-2-lauroyl-sn-glycero-3-Phosphocholine|PLPC； 1-Palmitoyl-2-lauroyl-sn-glycero-3-PC