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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 检测范围:
详询
- 检测方法:
ELISA
- 应用:
科研实验
- 适应物种:
牛
- 标记物:
详见说明书
- 样本:
血清、血浆、细胞及相关液体
- 规格:
48T/96T
烜雅生物以强大的专业背景、优质的客户服务,在市场竞争日益激烈的今天不断拼搏,开拓进取,与各界朋友携手共创美好未来。本司不仅有自己研发生产试剂盒,还代理国内外各大品牌试剂,细胞,标准品。欢迎新老顾客前来垂询。
牛钙;钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶2(CAMKK2)ELISA试剂盒(酶联免疫吸附试验法)使用说明书:请向我司客服索取。
中文名称:牛钙;钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶2(CAMKK2)ELISA试剂盒
规 格:48T/96T
方 法:ELISA
物 种:牛
价 格:敬请客户与我司取得联系获取实时报价
[实验原理]
牛钙;钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶2(CAMKK2)ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被指标捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的指标呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
[需要而未提供的试剂和器材]
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
4.蒸馏水或去离子水
样品处理方法:
血液样本
有些生理因素,如吸烟、进食、运动、情绪波动、妊娠、体位等均可影响血液中某些成分的变化,有些甚至还有昼夜变化。因此血液标本的采集应尽量避免生理因素干扰,以条件一致为宜,如无法避免,应在标本上注明该因素。
粪便样本
粪便标本的检测对判断消化系统疾病有重要参考价值。采集时要求用干净的竹签选取含有粘液、脓血等异常病变成分的粪便,对外观无异常的粪便须从表面、深处及粪端多处取材。找寄生虫虫体及作虫卵计数应收集24小时粪便。查痢疾阿米巴滋养体应于排便后立即检查,从有脓血和稀软处取材,保温送检。查日本血吸虫虫卵时应取粘液、脓血部分,孵化毛蚴时至少留取30g粪便,且需尽快处理。检查蛲虫卵须用透明薄膜拭子于晚12时或清晨排便前自肛门周围皱襞处拭取并立即镜检。隐血试验(化学法),试验前3日禁食肉类及含动物血食物并禁服铁剂,维生素C等。所有粪便标本采集后1小时内应检查完毕,以防止有形成分受消化酶及pH的破坏,来不及检测的,应及时用PBS进行缓冲处理,离心去上清保存。
ELISA的样本实验准备
在收集样本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行
检测的样本,及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本,及时分装后冻存在-20℃备用,有条件的,最好-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。
液体类标本: 包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等
培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
上海烜雅生物ELISA试剂盒牛奶样本处理方法:
方法1:取牛奶10ml入离心管,加入10ml EAC,超声震荡30min。然后4000g离心10min(如两相之间出现乳化层,则将样品瓶放在80℃的水浴中约5min,再离心)移取1ml EAC层至另外试管中,60℃氮气流下蒸干,残留物用缓冲液2ml缓冲后备用,前处理过程约需2小时。
方法2 :取10ml牛奶10℃3500G离心10MIN,祛除上层脂肪,ELISA试剂盒牛奶样本处理时,取5ml脱脂奶粉加入150微升17.2%,出现沉淀,漩涡混合。然后加入150微升53.5%硫酸锌。再次漩涡混合。15摄氏度3500g离心10分钟,取上层清液用缓冲液1:2稀释待用,前处理过程所需1小时。
★★★★★希望这些样本处理的方法可以帮到您★★★★★
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(ELISA)等。其优点是高特异性、高灵敏度、操作简便。缺点是不能证明被测细胞因子是否为具有完整生物活性结构的蛋白质而非变性蛋白质。 1.3 CKmRNA的测定 (1)分子杂交实验:首先制备出细胞因子的基因探针,通过分子杂交检测细胞内CKmRNA的表达。(2)逆转录PCR(RT-PCR)法技术:可快速、灵敏地检测表达很低的CKmRNA,并可同时测定同一样本中多种CKmRNA,操作过程包括细胞因子产生细胞的RNA提取,mRNA经逆转录合成cDNA,以cDNA为模板,在细胞因子引物的引导下,即可
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