- ￥55
- biosharp
- BL512A
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- 2025年10月29日
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上海研卉生物科技有限公司
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- 英文名：
胰酶细胞消化液（酚红）
- 规格：
100ml
biosharp BL512A 胰酶细胞消化液（酚红）
胰酶细胞消化液（含酚红）
产品简介：
胰酶细胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含 0.25%胰酶（Trypsin）、 0.02%EDTA和酚红，不含Ca2＋和 Mg2＋。该消化液已用 0.22 μm 滤膜过滤除菌，可以直接用于培养细胞的消化，或者一些组织的消化。本胰酶细胞消化液具有方便快速的特点，通常室温消化 1 分钟左右就可以消化下大多数贴壁细胞。
使用说明：
贴壁细胞的消化：
1、吸去培养液，用无菌的 PBS、Hanks 液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。
2、加入少量胰酶细胞消化液（含酚红），略盖过细胞即可，室温放置 30 秒至 2 分钟。不同的细胞消化时间有所不同。
3、显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化，或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来；此时吸除胰酶细胞消化液；加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
4、 如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。
5、如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g 离心 1 分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
组织的消化：
不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
注意事项：
1、 在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。
2、 胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长，否则细胞铺板后生长状况会较差。
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文献和实验适用于，无师兄、师姐、非细心、单独开展细胞培养的实验者 对一般细胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶，Trypsin) 配方：100ml PBS,0.25g胰酶 步骤：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2・12H2O /2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水) 2 称胰酶0.25g 3 加入PBS中，低速搅拌 〈4h冰浴中,或者4℃过夜 低速搅拌0.5h冰浴中
适用于，无师兄、师姐、非细心、单独开展细胞培养的实验者 对一般细胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶，Trypsin) 配方：100ml PBS,0.25g胰酶 步骤：1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2・12H2O /2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水) 2 称胰酶0.25g 3 加入PBS中，低速搅拌 〈4h冰浴中,或者4℃过夜 低速搅拌0.5h冰浴中
易造成细胞膜损伤而出现细胞坏死的假阳性，甚至会影响细胞膜上磷脂酰丝氨酸与Annexin V-荧光素的结合从而干扰对于细胞凋亡的检测。同时，胰酶细胞消化液中应尽量不含EDTA，因为EDTA可能会影响Annexin V与磷脂酰丝氨酸的结合。 加入步骤1中收集的细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，300 g离心5 min，弃上清，收集细胞，用PBS洗涤细胞一次，轻轻悬浮细胞并计数。 注意：加入细胞培养液非常重要，一方面可以收集已经悬浮的发生凋亡或坏死的细胞，另一方面细胞培养液中的血清
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