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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
147
- 英文名:
SDS-PAGE Stacking Gel Buffer
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输、4℃
- 规格:
250mL
特别提示:包括SDS-PAGE浓缩胶配胶液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:SDS-PAGE浓缩胶配胶液
英文名称:SDS-PAGE Stacking Gel Buffer
产品货号:BTN100867
产品规格:250mL
本产品专门用于配制非联续SDS-PAGE胶的浓缩胶,其浓度为4×,配胶时即开即用,非常方便。
储存条件:常温运输、4℃保存,有效期一年。
除了SDS-PAGE浓缩胶配胶液,,我公司还供应以下相关产品:
名称:真菌总蛋白质微量提取试剂盒
货号:BTN81202
规格:50次
本产品专门用于快速提取微量酵母蛋白用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析。本产品结合玻璃珠破壁和化学法破壁两种方法,适合于各种形态的各种酵母材料。
产品特点:
1.破壁效率高,能达到80-90%。
2.可以处理各种酵母样品。
3.操作简单,得到的裂解液可以直接用于SDS-PAGE和Western印迹分析。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 100ml |
| 溶液B成分一 | 50ml |
| 溶液B成分二 | 1.5g |
| 玻璃珠,400μm | 5g |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输、4℃保存(溶液B成分二需-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
准备工作:将溶液B成分二(干粉)全部加到50mL溶液B成分一中,充分摇晃使之全部溶解,成为溶液B,然后分装成小分(体积根据每次实验的样品数决定)并放-20℃长期保存。
1.将酵母细胞接种到5mL YPD培养基中,30℃摇晃(250rpm/分钟)过夜培养使其OD600达到0.5~2.0。
2.把酵母细胞培养物转到装有2mL预冷溶液A的10-15mL离心管中,混匀。
3.4℃,5000g离心5分钟沉淀酵母细胞,吸出上清液。
4.用30μL溶液B悬浮酵母细胞,并快速转移到1.5mL塑料离心管中。
5.100℃下保温3分钟,使蛋白酶失活,样品存放于-20℃。
6.加入0.1g的玻璃珠。
7.在旋涡振荡器上剧烈振荡混合2-10分钟。
8.加入70μl溶液B,稍加振荡,置100℃保温1分钟。
9.取5-20μl抽提液上样直接进行SDS-PAGE凝胶电泳。
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文献和实验1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响? 在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压剃度,压着蛋白质分子聚集到一起
迁移率即可在标准曲线上求得分子量。 Q:配胶缓冲液系统对电泳的影响? A:在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压剃度,压着蛋白质分子聚集到一起,浓缩
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量(垂直板型电泳)(图)
的,可以用SDS-凝胶电泳法测定其分子量。 SDS-PAGE有连续体系及不连续体系两种,这两种体系有各自的样品溶解液及缓冲液,但加样方式,电泳过程及固定、染色与脱色方法完全相同。三、器材与试剂: 1.器材: ①夹心式垂直板电泳槽,凝胶模(135×100×1.5mm)(北京六一仪器厂) ②直流稳压电源(电压300~600V,电流50~100mA) ③吸量管(1,5,10ml) ④烧杯(25,50,100ml) ⑤细长头的滴管
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