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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 库存:
40
- 生长状态:
半贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
详见说明书
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
淋巴母细胞样
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
详见说明书
- 英文名:
小鼠杂交瘤细胞;MAER-S1
- 规格:
株
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞;MAER-S1说明书
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:
3传代,3-4天传1次
传代情况 C9
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
小鼠杂交瘤细胞;MAER-S1说明书培养方法:
收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况,如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
培养实验又要开始了,科研工作者又该忙碌了,大家可能都在寻找适合自己的细胞,不用急,我们帮您掌舵,让您满意!
传代方法:细胞完全汇合时,倒掉旧液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,显微镜下观察细胞完全脱离瓶壁分离成单个细胞后弃掉胰酶,加培养基混匀分瓶,T25瓶中加培养基至6-8ml,T75瓶加培养基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培养。
小鼠杂交瘤细胞;MAER-S1说明书注意事项
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所 需细胞因子 等,确保细胞培养条件一致。若由于培养条件不一致而导致细胞出现问 题,责任由客户自行承担。
3. 用 75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量 从瓶 壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养 4~6 小时,再取出观察。此时多数细胞均 会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝 染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常, 请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活 力,请拍下 照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 静置细胞贴壁后,请将细胞瓶内的培养基倒出,留 6~8mL 维持细胞正常培养,待细 胞汇 合度 80%左右时正常传代。
5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞 传代时可以 一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
6. 建议客户收到细胞后前 3 天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 Procell 技术 部 沟通交流。由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联 系,告知细胞的具体情况,以便我们 的技术人员跟踪回访直至问题解决。
7.该细胞仅供科研使用。
小鼠杂交瘤细胞;MAER-S1说明书培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
以下是小鼠杂交瘤细胞;MAER-S1说明书的相关产品:
人 ACTR2 转录变体2 基因全长ORF克隆
人 PIGP 转录变体1 基因全长ORF克隆
人 sFRP-4 基因全长ORF克隆
小鼠 SIRPA 基因全长ORF克隆
小鼠 NSG2 基因全长ORF克隆
小鼠 ANGPT1 基因全长ORF克隆
小鼠 CXCL5 基因全长ORF克隆
大鼠 UQCRC2 基因全长ORF克隆
大鼠 ANAPC11 基因全长ORF克隆
食蟹猴 PROCR 基因全长ORF克隆
大鼠 CD3G 基因全长ORF克隆
人 PRICKLE2 基因全长ORF克隆 (表达载体), 带Myc标签
小鼠杂交瘤细胞;MAER-S1说明书PacritinibSB 1518; 11-[2-(1-pyrrolidinyl)ethoxy]-14,19-dioxa-5,7,27-triazatetracyclo[19.3.1.12,6.18,12]heptacosa-1(25),2,4,6(27),8,10,12(26),16E,21,23-decaene
AZD 10802-
IDE2 (10 mg)1-(2-cyclopentylidenehydrazide)-heptanedioic acid
2,3-Methylenedioxy Pyrovalerone (hydrochloride) (10 mg)1-(benzo[d][1,3]dioxol-4-yl)-2-(pipeidin-1-yl)pentan-1-one, monohydrochloride; 2,3-MDPV; 2,3-Methylenedioxy Pyrovalerone (hydrochloride)
Anti-sPLA2 (human Type IIA) EIA Strip Plate (5 ea)Secretory Phospholipase A2 (human synovial); Anti-sPLA2 (human Type IIA) EIA Strip Plate
Anti-Interleukin-1α (human) EIA Strip Plate (1 ea)Anti-Interleukin-1α (human) EIA Strip Plate
Prostaglandin D2-MOX AChE Express Tracer (100 dtn)PGD2-MOX EIA Express Tracer; Prostaglandin D2-MOX AChE Express Tracer
无水磷氢二钾(100GM)Sodium Pyruvate, Sodium Pyruvate
PRIMA-1MET (5 mg)APR 246; 2-(hydroxymethyl)-2-(methoxymethyl)-1-azabicyclo[2.2.2]octan-3-one
MCC-555 (10 mg)Isaglitazone|Netoglitazone|RWJ 241947; 5-[[6-[(2-fluorophenyl)methoxy]-2-naphthalenyl]methyl]-2,4-thiazolidinedione
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文献和实验位点) VH5’IgG-GGGGCGGCCGC GTTTTGGCTG[A/C][A/G]GAGAC[A/G/T]GTGA VH3’IgM-GGGGCGGCCGC TGACTCTCTG[A/C][A/G]GAGAC[A/G/T]GTGA 4)小鼠VL3’端引物(引入NotⅠ酶切位点) VL5’-GCGGCGGCCGC AGCCCGTTT[G/T]ATTTCCA[A/G]CTT (2)从杂交瘤细胞提取RNA,反转录成cDNA,均按试剂盒说明书操作。
这首先要从抗体的产生来探讨。把某一抗原免疫某种动物而得到单抗或多抗。如果用经免疫过的动物的脾细胞获得杂交瘤细胞,则得到单克隆抗体,如果用动物的血清,则得到多克隆抗体。但从理论上说,这些抗体都应针对抗原来自的动物,例如如果用 人蛋白 抗原免疫小鼠,则这些 抗体 为鼠抗人。 由于一个大蛋白分子表面具有多种抗原决定簇,因此,免疫动物后,这些不同的决定簇分别诱导动物产生不同的 抗体
瘤来源的动物是相同品系,例如使用SP2/0骨髓瘤细胞时应该选用Balb/C小鼠,同时必须使用品系纯正的小鼠。 (2)培养基中加入了过高浓度的HAT,或者仅A的浓度过高或HT的浓度过低,建议用纯的骨髓瘤和已有的杂交瘤作HAT浓度筛选。 (3)培养基不正确或血清浓度不正确或使用了劣质血清。 (4)未正确制备饲养层细胞。参见本站有关饲养层细胞制备的部份。 (5)接种杂交瘤细胞的培养板过多。一般在5-20块96孔板为宜。 (6)融合后,未及时转移或稀释
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