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- 库存:
100
- 细胞类型:
科研
- 品系:
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- 组织来源:
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- 物种来源:
鼠/人/其它
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 器官来源:
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- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 年限:
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- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 英文名:
CHL
传授CHL;中国仓鼠肺细胞细胞培养
细胞培养基本方法
【产品来源】 细胞主要来源ATCC、ScienCell、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系
细胞复苏步骤
一、所需仪器:
离心机
生物安全柜
电动移液器
CO2培养箱
倒置显微镜
液氮罐
恒温水浴锅
二、所需试剂:
胎牛血清(FBS)
无菌1×PBS pH=7.2
完全培养基
三、所需耗材:
离心管(15ml、50ml)
T-25细胞培养瓶
一次性无菌移液管(2ml、5ml、10ml)
四、操作步骤:
- 将恒温水浴锅中的水预热到37℃;
- 从液氮罐中取出要复苏的细胞,尽快转入恒温水浴锅中复温,工程中需要不断震荡冻存管以提高复温速率;
- 将融化了的冻存管中的用移液管转入一直装有5ml完全培养基的15ml离心管中,充分混匀后,300g离心5min;
细胞冻存步骤
一、所需仪器:
-86℃超低温冰箱
离心机
生物安全柜
电动移液器
CO2培养箱
倒置显微镜
液氮罐
二、所需试剂:
胎牛血清(FBS)
细胞培养级DMSO
冻存液:80%FBS+20%DMSO
无菌1×PBS pH=7.2
消化液:0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA
isopropanol
三、所需耗材:
离心管(15ml、50ml)
T-25细胞培养瓶
一次性无菌移液管(2ml、5ml、10ml)
1.8ml冻存管
程序降温盒
四、操作步骤:
- 将需要那冻存的细胞从CO2培养箱中取出,在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,吸弃瓶内的培养基;
- 向培养内加入无菌1×PBS 3ml,之后水平放置培养瓶,旋转震荡培养瓶,使PBS能够浸润到培养平面上所都的面积,吸弃PBS;
- 重复步骤2一次,之后向瓶内加入消化液1ml,轻微震荡后放入37℃CO2培养箱中孵育2-4min;
- 孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起,如还有部分细胞为消化下来,可在生物安全柜内用移液管吸起消化液,吹打培养平面;
- 向消化下细胞的培养瓶中加入1ml含血清的完全培养基终止消化,然后将培养瓶中的液体转入15ml离心管中,300g离心5min;
- 离心完成后,弃上清,用0.5mlFBS重悬细胞,再加入0.5ml冻存液,用移液管充分混匀,之后转入1.8ml冻存管中;
- 将冻存管转入填充满isopropanol的程序降温盒中,之后转入-80℃冰箱中过夜降温;
★★★★★希望这些培养的方法可以帮到您★★★★★
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★我库细胞近3000种,来源于美国ATCC.细胞都是经过严格质量控制。
冻存细胞时间为5-7个工作日,活细胞为7-15个工作日。
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文献和实验细胞 2.大鼠类 BRL 肝细胞 LW-3 肝细胞 BRL 3A 肝细胞 NRK 肾细胞 L-6TG 肌母细胞 3.仓鼠类 BHK 幼仓鼠肾 V79 中国仓鼠肺细胞 CHL 中国仓鼠肺细胞 CHO 中国仓鼠卵巢细胞 R1610 中国仓鼠体细胞 *CHO/dhFr- 二氢叶酸还原酶缺陷型CHO 4.人类 2BS 胚肺 XJH B淋巴细胞 HLF 胚肺 L-02 肝细胞
NRK 肾细胞L-6TG 肌母细胞 3.仓鼠类BHK 幼仓鼠肾V79 中国仓鼠肺细胞CHL 中国仓鼠肺细胞CHO 中国仓鼠卵巢细胞R1610 中国仓鼠体细胞*CHO/dhFr- 二氢叶酸还原酶缺陷型CHO4.人类 2BS 胚肺 XJH B淋巴细胞 HLF 胚肺 L-02 肝细胞 WI-38 胚肺 Chang Liver 张氏肝 SL-7 胚肺 QSG-7701 肝细胞 H.A. 羊膜 293 Ad5DNA转化的胚肾 WISH 羊膜
6.8 的 1 / 15 mol/L 磷酸盐缓冲液。二、 试验方法2.1 受试物固体受试物应溶解于适合的溶媒中,并稀释至适当浓度。液体受试物可直接使用或稀释至适当浓度使用。受试物应无菌现用现配,否则须确认储存不影响其稳定性。2.2 细胞可选用中国仓鼠肺细胞株 (V79、CHL) 或卵巢细胞株 (CHO)、小鼠淋巴瘤细胞株 (L5178Y)、人外周血淋巴细胞株 (如 TK6) 和原代培养细胞。推荐使用 CHL 或 L5178Y 细胞株。细胞在使用前应进行染色体数目稳定性和有无支原体污染的检查。汇智泰康体外微核
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