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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
100
- 细胞类型:
科研
- 品系:
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- 组织来源:
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- 物种来源:
鼠/人/其它
- 细胞形态:
上皮样/成纤维样/其它
- 器官来源:
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- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 年限:
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- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 英文名:
3T3
传授3T3;小鼠胚胎成纤维细胞细胞培养
细胞培养基本方法
【产品来源】 细胞主要来源ATCC、ScienCell、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系
细胞复苏步骤
一、所需仪器:
离心机
生物安全柜
电动移液器
CO2培养箱
倒置显微镜
液氮罐
恒温水浴锅
二、所需试剂:
胎牛血清(FBS)
无菌1×PBS pH=7.2
完全培养基
三、所需耗材:
离心管(15ml、50ml)
T-25细胞培养瓶
一次性无菌移液管(2ml、5ml、10ml)
四、操作步骤:
- 将恒温水浴锅中的水预热到37℃;
- 从液氮罐中取出要复苏的细胞,尽快转入恒温水浴锅中复温,工程中需要不断震荡冻存管以提高复温速率;
- 将融化了的冻存管中的用移液管转入一直装有5ml完全培养基的15ml离心管中,充分混匀后,300g离心5min;
细胞冻存步骤
一、所需仪器:
-86℃超低温冰箱
离心机
生物安全柜
电动移液器
CO2培养箱
倒置显微镜
液氮罐
二、所需试剂:
胎牛血清(FBS)
细胞培养级DMSO
冻存液:80%FBS+20%DMSO
无菌1×PBS pH=7.2
消化液:0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA
isopropanol
三、所需耗材:
离心管(15ml、50ml)
T-25细胞培养瓶
一次性无菌移液管(2ml、5ml、10ml)
1.8ml冻存管
程序降温盒
四、操作步骤:
- 将需要那冻存的细胞从CO2培养箱中取出,在生物安全柜内,打开培养瓶瓶口,吸弃瓶内的培养基;
- 向培养内加入无菌1×PBS 3ml,之后水平放置培养瓶,旋转震荡培养瓶,使PBS能够浸润到培养平面上所都的面积,吸弃PBS;
- 重复步骤2一次,之后向瓶内加入消化液1ml,轻微震荡后放入37℃CO2培养箱中孵育2-4min;
- 孵育完成后在倒置显微镜下观察细胞是否变圆飘起,如还有部分细胞为消化下来,可在生物安全柜内用移液管吸起消化液,吹打培养平面;
- 向消化下细胞的培养瓶中加入1ml含血清的完全培养基终止消化,然后将培养瓶中的液体转入15ml离心管中,300g离心5min;
- 离心完成后,弃上清,用0.5mlFBS重悬细胞,再加入0.5ml冻存液,用移液管充分混匀,之后转入1.8ml冻存管中;
- 将冻存管转入填充满isopropanol的程序降温盒中,之后转入-80℃冰箱中过夜降温;
★★★★★希望这些培养的方法可以帮到您★★★★★
质量可靠,售后有保障
★我库细胞近3000种,来源于美国ATCC.细胞都是经过严格质量控制。
冻存细胞时间为5-7个工作日,活细胞为7-15个工作日。
★由于细胞库现有细胞类目多,为了不出现混乱错误,需要了解相关细胞价格及详细资料请老师联系我们,对您造成的不便还请见谅!
★注:如运输过程中导致细胞污染或者死亡,我们将无条件补发
收货后十个工作日内有其他问题提供照片可半价重发
3T3;小鼠胚胎成纤维细胞说明书请向我司客服索取
3T3;小鼠胚胎成纤维细胞(相关产品):
| 高效蓄冷未注水冰袋(铝铂复合外包) | (200g)*10个/*100个 |
| 高效蓄冷未注水冰袋(铝铂复合外包) | (400g)*10个/*100个 |
| 抗血清系列 | |
| 抗猪瘟病毒(CSFV)血清 | 10000ml/25000ml |
| 猪抗口蹄疫病毒(FMDV)血清 | 10000ml/25000ml |
| 抗圆环病毒(PCV)蓝耳病病毒(PRRSV)血清 | 10000ml/25000ml |
| 兔抗牛血清白蛋白抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗鸡卵清蛋白抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗人血清白蛋白抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗牛酪蛋白抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗辣根过氧化物酶抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗乙肝核心抗原抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗乙肝E抗原抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗乙肝表面抗原抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗人IgG(H+L)抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗猴IgG(H+L)抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗猪IgG(H+L)抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗马IgG(H+L)抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗牛IgG(H+L)抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗山羊IgG(H+L)抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗绵羊IgG(H+L)抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗大鼠IgG(H+L)抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗小鼠IgG(H+L)抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗鸡IgY (H+L)抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗鸭IgY (H+L)抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗豚鼠IgG(H+L)抗血清 | 1ml/10ml |
| 兔抗人IgM(H+L)抗血清 | 1ml/10ml |
| 山羊抗人IgM(H+L)抗血清 | 1ml/10ml |
| 山羊抗人IgG(H+L)抗血清 | 1ml/10ml |
| 山羊抗小鼠IgG(H+L)抗血清 &nb |
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文献和实验(1)准备大量的3T3细胞,每个安瓿瓶装1-1000000个细胞,然后冻存。使用的细胞不超过20代。(2)将3T3细胞加入175cm2的培养瓶中,用含有10%小牛血清DMEM培养。案每平方厘米15000个细胞接种。2天后换液,每4-5天传代。(3)通过60Gy X射线或Co饲养细胞灭活。被照射的3T3细胞在4度条件下可存放3-4天。(4)在无照射源的条件下,用丝裂菌素C灭活饲养细胞。(5)在37度条件下,用400微克每毫升的丝裂菌素C处理单层3T3细胞1h。(6)用胰蛋白酶消化丝裂菌素C处理
小鼠胚胎成纤维细胞的富集1、给13-14天的孕鼠注射大约0.5ml阿佛丁。当鼠麻醉后,实施断颈法处死小鼠。2、用70%乙醇擦拭腹部,把皮肤向后拉,暴露出腹膜。用消毒过的工具,剪开腹壁以暴露出子宫角。将子宫角移到10cm的皿里。用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。3、用剪刀剪开每一测的胚囊,并将胚胎移到培养皿中。4、用两副钟表镊子将胎盘和膜与胚胎分离开,分离后切除内脏(所有深色的东西)。将胚胎转移到(有盖)培养皿中,用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。5、用带有弯钩的眼科剪将组织剪碎,当你剪
小鼠胚胎成纤维细胞的富集 1、给13-14天的孕鼠注射大约0.5ml阿佛丁。当鼠麻醉后,实施断颈法处死小鼠。 2、用70%乙醇擦拭腹部,把皮肤向后拉,暴露出腹膜。用消毒过的工具,剪开腹壁以暴露出子宫角。将子宫角移到10cm的皿里。用10ml不含钙镁离子的PBS洗三遍。 3、用剪刀剪开每一测的胚囊,并将胚胎移到培养皿中。 4、用两副钟表镊子将胎盘和膜与胚胎分离开,分离后切除内脏(所有深色的东西)。将胚胎转移到(有盖)培养
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