转氢酶-2测试盒(微量法)

特别提示：包括转氢酶-2测试盒(微量法)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：转氢酶-2测试盒(微量法)
产品货号：SK097-1
产品规格：100管/96样

测定意义:
TH位于线粒体的内膜上，又称为线粒体复合体六，催化NADH+NADP+和NAD++NADPH相互转化，调节线粒体NAD(H)和NADP(H)平衡。把逆向反应称为TH-2，催化NADPH和NAD+生成NADP+和NADH。

测定原理：
NADH和NADPH均在340nm有特征吸收，因此TH催化的转氢反应不能导致340nm吸光度发生变化。用人工合成底物3-乙酰*啶腺嘌呤二核苷酸(APAD+)替代NAD+，TH-2催化APAD+还原生成APADH，APADH在375nm有特征光吸收，测定375nm光吸收的增加速率，来计算TH-2活性。

需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

除了转氢酶-2测试盒(微量法),，我公司还供应以下相关产品：



名称：抗坏血酸氧化酶活性测试盒(比色法)
货号：SNM042
规格：50T/48样
检测指标：抗坏血酸氧化酶活性;AAO活性

名称：细胞丙二醛测定试剂盒(微板法)
货号：SNM202
规格：400T
检测指标：细胞丙二醛;MDA
本试剂盒可测各种动物培养细胞等样本中丙二醛的含量。机体通过酶系统与非酶系统产生氧自由基，后者能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸，引发脂质过氧化作用，并因此形成脂质过氧化物。如：醛基（丙二醛MDA）、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基，以及新的氧自由基等。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂，即非自由基性的脂类分解产物，而且通过链式或链式支链反应，放大活性氧的作用。因此，初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形成，这些分解产物中，一些是无害的，另一些则能引起细胞代谢及功能障碍，甚至死亡。氧自由基不但通过生物膜中多不饱和脂肪酸的过氧化引起细胞损伤，而且还能通过脂氢过氧化物的分解产物引起细胞损伤。因而测试 MDA的量常常可反映机体内脂质过氧化的程度，间接地反映出细胞损伤的程度。MDA的测定常常与SOD的测定相互配合，SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力，而MDA的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度，通过SOD与MDA的结果分析有助于医学、生物学、药理及工农业生产的发展。

产品优点如下：
1、操作简便：可将试剂混合成单试剂操作，全程约50分钟，可测48例左右样本。
2、稳定性好：试剂盒2～8℃存放12个月有效,试剂配制后至少能存放6个月；呈色稳定，显色后24小时吸光度不变。
3、再现性好：批内CV=2.3%，批间CV=5.34%。
4、回收试验： X =101.8%。
5、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。
6、适用于细胞样本。

名称：黄嘌呤检测试剂盒(比色法)
货号：HR8717
规格：100T

名称：组织活性氧(ROS)检测试剂盒(O12)
货号：HR8820
规格：100T
活性氧(Reactive oxygen species,ROS) 包括超氧自由基、过氧化氢、及其下游产物过氧化物和羟化物等，参与细胞生长增殖、发育分化、衰老和凋亡以及许多生理和病理过程。
组织活性氧检测试剂盒是一种利用新型荧光探针O12进行组织活性氧检测的试剂盒。本试剂盒中的O12 ROS探针为绿色荧光的活性氧探针，具有488/520nm的最大激发/发射波长。
O12 ROS探针在组织中活性氧存在的条件下，被氧化生成绿色荧光物质，绿色荧光强度与组织内活性氧水平成正比，检测O12产物的荧光就可以知道组织内活性氧的水平。
O系列活性氧探针具有多种颜色可以选择，可根据情况对样品进行多色标记实验。除了本试剂盒的绿色荧光探针，我公司还可以提供红色荧光的活性氧检测试剂盒。
在激发波长488 nm，发射波长520 nm附近，使用荧光分光光度计、荧光酶标仪、等检测O12产物荧光，从而测定组织内活性氧水平。
本试剂盒可以用于各种动物和植物样本的检测。本试剂盒提供了活性氧阳性对照试剂，以便于活性氧的检测。
本试剂盒只可以用于新鲜组织样本的活性氧检测，不可以用于冻存的组织样本的活性氧检测。
以每个组织样本50mg计，本试剂盒小包装可以染色100个样本。
我公司还可以为您提供各种细胞样本、冰冻切片样本的活性氧、活性氮等各种颜色的检测试剂盒产品。

储存条件：匀浆液2-8℃保存；探针-20℃避光保存；阳性对照-20℃保存。
有效期：一年。

※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制：本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我公司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要最新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。

注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

产品特点：
● 使用方便：可用荧光分光光度计、荧光酶标仪检测；
● 背景低，灵敏度高；
●线性范围宽，使用方便。
试剂盒以外自备仪器和试剂耗材：
仪器：
●荧光分光光度计或荧光酶标仪，激发波长488nm，发射波长520±10 nm，或者按照FITC荧光检测条件检测 ● 离心机 ● 移液器 ● 冰箱 ● 冰盒
试剂：
● PBS缓冲液(pH7.4，实验室常用的10mM磷酸缓冲盐溶液)
●或者HBSS(With：Calcium Magnesium Glucose；Without：Phenol Red)
● BCA蛋白定量试剂盒/Bradford/Lowrry等
耗材：
● 离心管 ● 吸头

使用方法：

使用注意事项：
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。
● O12染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否者容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。
● 使用前，先将本品取出回温至室温，并对其进行简短离心使DMSO溶液集中于管底。
● 尽量缩短探针标记后到测定所用的时间，以减少各种可能的误差。
● 阳性对照诱导剂可以按照1:1000的比例使用。例如标记好探针的细胞共1ml，可以加入1μl的阳性对照诱导剂刺激。通常刺激后20-30分钟内可以观察到非常显著的活性氧水平升高。对于不同的细胞，活性氧阳性对照的效果可能有较大的差别。如果在刺激后30分钟内观察不到活性氧的升高，可以适当提高活性氧阳性对照诱导剂的浓度。如果活性氧升高得过快，可以适当降低活性氧阳性对照诱导剂的浓度。
试剂准备：
根据样本数量，用纯水将O12探针10倍稀释。充分混匀，备用。
【注】
● 不可以一次性将探针全部稀释。
● 现配现用。
样本处理：
1．刚取得的新鲜组织样本用PBS洗净。
2．准确称取50mg组织，加入1ml匀浆缓冲液A，用玻璃匀浆器充分匀浆。
3．在1000g，4℃离心10分钟，弃沉淀，取上清。
样本检测：
1．在96孔板中加入190μl匀浆上清液、10μl O12探针，用移液器吹打，使之充分混匀。
【注】
● 选做：如有必要，可以做一个阳性对照，匀浆上清加入探针后再加入10μl阳性对照。
2．在37℃避光孵育30分钟。
3．置于酶标仪中，后于激发波长为488nm、发射波长530nm检测荧光强度。
蛋白定量：
1．另取50μl上清匀浆液，用PBS大约稀释30倍。
2．取100μl进行蛋白定量。
结果处理：
以荧光强度/毫克蛋白表示组织活性氧强度。