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大量
- 保质期:
2个月
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 保存条件:
-20℃
- 规格:
2×100ml
产品简介:
组织在制作过程中,由于化学试剂的作用封闭了抗原,又由于热的作用致使部分抗原的肽链发生扭曲,致使在免疫组化的染色过程中不能将其显示出来,为了解决上述的问题,利用化学试剂和热的作用将这些抗原重新暴露出来或修正过来的过程称为抗原修复。柠檬酸盐、EDTA或Tris等缓冲液在热的条件下可以使被福尔马林屏蔽的抗原重新暴露出来,同时又不会对抗原表位造成破坏,从而提高抗原的检出率,降低背景染色,提高诊断的准确率。
在热诱导抗原修复法出现之前,胰蛋白酶、蛋白酶K、胃蛋白酶等酶类的诱导的表位修复是常用的方法。胰蛋白酶抗原修复试剂盒能暴露石蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。通常石蜡切片都需进行抗原修复处理,而冰冻切片可以不进行抗原修复处理,抗原修复可以提高石蜡切片的免疫染色效果,亦可以不同程度的提高冰冻切片的染色效果。当冰冻切片免疫染色效果不理想时,可考虑进行抗原修复。按照每个片子需要10ml抗原修复液(1×)计算,100ml抗原修复液可以用于10个样本的抗原修复。
胰蛋白酶抗原修复试剂盒
操作步骤(仅供参考):
(一)石蜡切片
1、脱蜡至水
①二3次,每次3~5min。
②无水乙醇脱水2次,每次3~5min。
③95%的乙醇,3~5min。
④90%的乙醇,3~5min。
⑤80%的乙醇,3~5min。
⑥70%的乙醇,3~5min。
⑦蒸馏水冲洗2次,每次3~5min。
2、抗原修复:将切片浸泡在胰蛋白酶溶液中,37℃孵育10~25min。
3、TB漂洗液洗涤1~2次,自来水洗涤,每次3~5min,彻底漂洗干净。
4、进行后续的免疫染色步骤。
(二)冰冻切片:
1、免疫染色洗涤液或自来水洗涤切片5min。
2、抗原修复:将切片浸泡在胰蛋白酶溶液中,37℃孵育10~25min。
3、TB漂洗液洗涤1~2次,自来水洗涤,每次3~5min,彻底漂洗干净。
4、进行后续的免疫染色步骤。
(三)其它样品:
其它样品参考石蜡切片或冰冻切片进行操作。
胰蛋白酶抗原修复试剂盒
注意事项:
胰蛋白酶溶液恢复至室温后再使用,但应避免反复冻融。
浸泡在胰蛋白酶溶液中,佳孵育时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验时样本之间干扰。 Q:说明书上写细胞量为 1~5 × 105 ,细胞量多的话对检测结果有没有影响? A:建议细胞量最多不要超过 106个,过量的细胞相当于染料被稀释,影响染色和分离效果。一般 2×105 个细胞足够进行凋亡检测了,通常情况下检测 10,000 个细胞就能得到比较好的结果。 Q:是否可以用 PBS 替代凋亡试剂盒里面的 Binding Buffer? A:不行,Binding Buffer 是必须要加的,Annexin V 与 PS 的结合依赖 Ca2+,Binding
化作用——氧分子、过氧化氢、氧自由基 5. 表面活性剂和去污剂 6.变性剂——脲和盐酸胍、高浓度盐、螯合、有机溶剂 7. 重金属离子和巯基试剂 8. 热 9. 机械力 10. 冷冻和脱水 11. 辐射 5. 酶活计算 ① 酶活定义 酶的活力单位:酶的1个活力单位是在该酶的最适条件下,在25℃、1 min内催 1μmol的底物转化为产物的酶量。 ② 定时法的计算 将酶与底物在特定条件下孵育,酶促反应开始进行,经过一定时间后,用终止液终止反应,通过化学或生物化学的方法测出底物或产物的总变化量,除以时间即可
针对同一指标,生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗?
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律,但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应,其反应过程可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图,如下所示: 延迟区:无规律可寻。 等速区:对应的是速率法,一般应用于酶活力的检测。 过渡区:对应的是固定时间法,目的是解决某些化学反应的非特异性问题,提高准确度。 平衡区:对应的是终点法,主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
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