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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温,避光
- 保质期:
3年
- 英文名:
M9 Minimal Salt,5×
- 库存:
10
- 供应商:
上海瑞楚生物科技有限公司
- 规格:
250g/瓶
用途:用于制备M9低盐培养基,培养重组大肠杆菌菌株;
培养基配方( /L)
Disodium Phosphate (anhydrous) (无水磷酸氢二钠) 33.9g
Monopotassium Phosphate (无水磷酸二氢钾) 15.0g
Sodium Chloride(氯化钠) 2.5g
Ammonium Chloride(氯化铵) 5.0g
pH6.8±0.2(25℃)
使用说明
称取本品56.4克于1L蒸馏水或去离子水中,121℃高压灭菌15分钟,冷却。
制备M9低盐培养基:无菌量取200ml灭菌后的培养基,加入无菌水750ml,冷至45-50℃,无菌水定容至1L。无菌操作加入20ml无菌的20%葡萄糖溶液和2ml无菌1.0M硫酸镁溶液,视情况如有需要可添加0.1ml无菌1.0M氯化钙溶液或适量的氨基酸。混匀,分装,备用。
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文献和实验的复杂了,更不利于后期的研究了。 第三步初步浓缩(也可省略此步):是不是在提取干细胞上清外泌体过程中会有看不到沉淀的时候?这时心中就没了谱,下游的检测项目做的更是提心吊胆。因此,在这里给出了通过超滤方法进行浓缩处理的建议。超滤的原理就是利用一定的尺寸大小的滤膜拦住大颗粒物而放过小颗粒物的原理,在离心管中最终呈现上液和下液,我们在根据实验目的各取所需。针对细胞上清液的特点,建议可以使用 10 KD ~ 100 KD 之间的超滤管来进行样品浓缩,外泌体通常是在超滤离心管的上室中,浓缩倍数控制到 5 倍
什么样提取方法都很难看到外泌体沉淀,心中就没了谱,下游的检测项目做的更是提心吊胆。因此,在这里给出了通过超滤方法进行浓缩处理的建议。超滤的原理就是利用一定的尺寸大小的滤膜拦住大颗粒物而放过小颗粒物的原理,在离心管中最终呈现上液和下游,我们在根据实验目的各取所需。针对细胞上清液的特点,建议可以使用 10 KD ~ 100 KD 之间的超滤管来进行样品浓缩,外泌体通常是在超滤离心管的上室中,浓缩倍数控制到 5 倍左右;针对干细胞、神经细胞等可以将浓缩倍数提升到 10 倍左右,因为这些细胞外泌体分泌量相对肿瘤
离心管浓缩 3-5 倍(超滤柱上层液体即为浓缩后的样品),准备 50 mL 以上的浓缩液再使用本试剂盒提取外泌体。 8、细胞上清液的浓缩倍数该如何选定? 由于不同细胞在不同培养条件下外泌体分泌量差异较大,因此针对上清液的浓缩倍数无法给出具体数值。建议先选定一个倍数进行样品浓缩,以外泌体纯化过程中EPF柱堵柱现象作为浓缩倍数是否合适的依据,如果 EPF 柱出现堵柱现象,则可适当降低超滤浓缩倍数。 9、加了 ECS 液离心之后无沉淀,这个现象正常吗? 由于某些细胞(如悬浮细胞、干细胞、免疫细胞、神经









