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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温,避光
- 保质期:
3年
- 英文名:
Buffered MUG Agar
- 库存:
10
- 供应商:
上海瑞楚生物科技有限公司
- 规格:
100g/瓶
执行标准:SN/T1059.2;
用途:用于滤膜法测定大肠杆菌;
培养基配方( /L)
Disodium Hydrogen Phosphate (磷酸氢二钠) 8.23g
Monosodium Phosphate (磷酸二氢钠) 1.2g
Mμg(4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷酸) 0.1g
Agar(琼脂) 15.0g
pH7.4±0.2(25℃)
使用说明
称取本品24.53克于1L蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,分装,121℃高压灭菌15分钟,灭菌结束后请摇匀,倾注平板,凝固,备用。
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文献和实验和运行时可作为样品的pH 指示剂(图 3A)。常用染料包括溴酚蓝、二甲苯青、苯酚红、和橙色 G。选择上样缓冲液时,需注意染料的表面迁移(s)(图 3B, 表 5 和 6)以避免遮盖目的核酸条带,特别是分子大小接近时(图 3C)。染料遮盖会影响目的条带的分析和量化,导致结果不可靠。 图 3. 中性pH中染料颜色。(B)在 TAE 和 TBE 缓冲液中不同百分比琼脂糖里的染料迁移。(C)在可视化过程中染料阴影遮盖条带。 3. 运行电泳 在凝胶、标准品和样品制备后,进行电泳。拆卸梳子和添加电泳缓冲
限制性内切酶的作用特点以及使用方法。掌握 DNA 琼脂糖凝胶电泳的操作与 DNA 片段的回收。【实验原理】目的 DNA 被限制性核酸内切酶水解后产生大小不同的 DNA 片段,这些 DNA 片段在一定浓度的琼脂糖凝胶电泳上可以按分子大小不同而分开,并可以用不同的方法再把这些 DNA 片段从琼脂糖凝胶上回收回来。限制性核酸内切酶水解 DNA 的活性与酶的单位数,缓冲液的离子强度和反应温度有关。【实验试剂与器材】限制性内切酶10×内切酶缓冲液琼脂糖(一)DNA 分子的酶切消化【实验方法与步骤】DNA
获细胞,加入适量细胞裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂),冰上裂解 30 min,细胞裂解液于 4 ℃,最大转速离心 30 min 后取上清; 取少量裂解液以备 Western blot 分析,剩余裂解液加 1 μg 相应的抗体加入到细胞裂解液,4 ℃ 缓慢摇晃孵育过夜; 取 10 μl protein A 琼脂糖珠,用适量裂解缓冲液洗 3 次,每次 3 000 rpm,离心 3 min; 将预处理过的 10 μl protein A 琼脂糖珠加入到和抗体孵育过夜的细胞裂解液中 4 ℃ 缓慢摇晃孵育
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