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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃&-80℃
- 保质期:
3个月~12个月
- 英文名:
pGADT7质粒
- 库存:
41
- 供应商:
上海禾午生物科技有限公司
- 规格:
2ug冻干粉&300ul甘油菌
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文献和实验构建 ① 设定温度梯度(26-35°C)和时间梯度(12-72 h),对龙须菜进行高温胁迫。 ② 提取龙须菜总RNA(RNA提取按照Qiagen试剂盒说明书进行,RNeasy Plant Mini Kit,Qiagen)。 ③ 应用SMART技术构建龙须菜高温胁迫表达cDNA文库,3’和5’引物分别加接酶切位点。 4.文库筛选载体构建 将龙须菜高温胁迫表达文库cDNA双酶切,连入同样双酶切的AD 克隆质粒pGADT7中,用PEG/LiAc 转化
表达的调控,单单靠GLA4不知道能不能起到调控蛋白表达的目的?有这方面的文献吗?先谢谢各位大侠的帮助了!!!! shilei5794749 类似GAL4-UAS系统,楼主可以借鉴这个系统。GLA4可以用pGBKT7或者pBIND上的,做成删除NLS序列的GAL4(BD+AD)或者GAL4BD-VP16。此质粒还可融合你要研究的蛋白,上游可以加调控元件。 另一个质粒用UAS序列打头,后置报告基因就行啦! 版主dnazyme留言:
的功能蛋白编码基因,验证反式转录调控因子的DNA结合结构域,准确定位参与特定蛋白质结合的核苷酸序列。 酵母单杂交用的cDNA文库用什么试剂盒构建? 单杂交文库可以用酵母双杂交试剂盒中的SMART试剂盒来构建 用BD公司的酵母单杂交文库构建和筛选试剂盒进行酵母单杂交文库的构建。具体操作步骤为:在15 mL试管中依次加入如下成分:20 μL SMART cDNA、6 μL pGADT7-Rec2(0.5 μg/μL,SmaI-线性化)、5 μg pHIS2-PBE
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