乙酸-DTT消化液(清洗液)

清洗液的作用原理及配制

仪及微量滴管。 (5)5％～10％乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)溶液：加热煮沸可洗脱玻璃 仪器 内壁的白色沉淀物。 (6)尿素洗涤液：为蛋白质的良好溶剂，适用于洗涤盛过蛋白质制剂及血样的容器。 (7)有机溶剂：如丙酮、乙醚、乙醇等可用于洗脱油脂、脂溶性染料污痕等，二甲苯可洗脱油漆 的污垢。 (8)氢氧化钾的乙醇溶液和含有高锰酸钾的氢氧化钠溶液：这是两种强碱性的洗涤液，对玻璃仪

三氯乙酸-丙酮法提取植物全蛋白

1. 前言 在蛋白质组研究中，双向电泳图谱的比较占有重要地位。双向电泳必须能很好地分离各个蛋白质，应尽量避免拖尾、横纹或因蛋白质降解而产生的假相。蛋白质在图谱上的分布模式必须是可重复的。蛋白质样品的制备是这些条件得以保持的重要前提。植物蛋白提取的难点在于植物细胞中蛋白质的含量低，同时还含有很多干扰蛋白提取的有机物 ，如酚类、色素、脂类及核酸等 [1] 。提取出的蛋白必须溶解在与等电聚焦 （IEF ) 电泳缓冲系统兼容的样品溶液中。 经过在各种植物组织中的试验，我们建立了一种以三氯乙酸

SDS-PAGE电泳常见问题分析

（1）还原SDS处理：在上样buffer中加入SDS和DTT(或Beta巯基乙醇)后，蛋白质构象被解离，电荷被中和，形成SDS与蛋白相结合的分子，在电泳中，只根据分子量来分离。一般电泳均按这种方式处理，样品稀释适当浓度，加入上样Buffer，离心，沸水煮5min，再离心加样。 （2）带有烷基化作用的还原SDS处理：碘乙酸胺的烷基化作用可以很好的并经久牢固的保护SH基团，得到较窄的谱带;另碘乙酸胺可捕集过量的DTT，而防止银染时的纹理现象。100μl样品缓冲液中10μl 20%的碘乙酸