动物组织蛋白抽提试剂盒

特别提示：包括动物组织蛋白抽提试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：动物组织蛋白抽提试剂盒
英文名称：Total protein extraction reagents for mammalian tissue
产品货号：ZN2919
产品规格：10ml|30ml|100ml

本品对于0.1的组织抽提样品可以抽提100个样，本产品可在60分钟的时间内完成蛋白的提取。

本制品可以从哺乳动物组织样品中温和的抽提总蛋白。该试剂利用温和且可透析的去垢剂裂解组织内的细胞，通过均化作用实现哺乳动物组织样本中的蛋白最大溶解效率。该试剂可以根据不同的应用要求在进行细胞裂解之前向其中加入蛋白酶抑制剂、盐、还原剂、螯合剂等。利用该试剂制备的裂解物可直接用于报告基因实验分析，蛋白激酶分析，免疫分析以及蛋白纯化实验等下游分析。使用本试剂对冷冻和新鲜组织提取的蛋白进行验证，证明可以得到较高的蛋白产量。

注意事项：
1.抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
2.裂解得到的蛋白样品，含有较高浓度的去垢剂，不建议用Bradford法测定蛋白浓度，可以选用 BCA 蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。
3.抽提的可溶性蛋白处于非变性状态，可直接用于免疫沉淀反应和其他亲和纯化过程。
4.可透析，确保其与随后的分析系统兼容。

保存：4℃，一年有效。

除了动物组织蛋白抽提试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：



名称：考马斯亮蓝染色液(常规法)
货号：YT057
规格：250ml
本品是以考马斯亮蓝R250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳胶的常规染色，或Western转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。本染色液可以和百奥莱博的考马斯亮蓝染色脱色液(YT058)配套使用。使用本染色液进行染色，采用常规染色方法需至少1小时可以完成染色；采用快速染色方法数分钟即可完成染色。本染色液经过改良，不含有毒的甲*，但含有刺激性气味的乙酸。

储存条件：室温，有效期一年。

名称：低背景ECL化学发光检测试剂盒
货号：WE0307
规格：50ml|250ml
  低背景化学发光检测试剂盒是免疫印迹实验中与辣根过氧化物酶(HRP)配套使用的的低背景底物检测试剂盒。本产品能够在HRP的催化下发生化学反应而发光，可用于检测固定在膜上的蛋白质等生物大分子。其高灵敏度能够检测ng级别的抗原，发光信号强
烈持久，可以使用照相技术(X-光胶片曝光)或者其他成像方法(如荧光或化学发光成像仪)进行检测。

试剂盒组成：

组成	50ml	250ml
cwECL-A(Luminol)	25ml	125ml
cwECL-B(Peroxide)	25ml	125ml

注意事项：
1、在与膜发生接触过程中，请佩戴手套且使用干净镊子等洁净器材，避免蛋白污染及高背景。
2、避光条件下，配制好的化学发光检测底物工作液可在室温下稳定保存8小时。阳光或其他强光会影响工作液，故应避免强光长时间的照射。正常实验室灯光短时间照射不影响工作液的使用。
3、百奥莱博提供多种蛋白转移用膜、封闭液、一抗、酶标二抗、缓冲液等，详情请查询公司网站。

操作步骤：
1、二抗孵育完毕后，将印迹膜充分洗涤。
2、根据需要量，将cwECL-A和cwECL-B按照1：1的比例等体积混合，配制为发光检测底物工作液(一张8 cm×6 cm的膜大约使用1ml工作液)。
3、弃去洗涤缓冲液，将发光底物工作液滴加在印迹膜上，确保工作液覆盖整张膜，室温孵育3-5分钟。
4、用移液器吸去多余发光底物工作液，将印迹膜置于两层干净的塑料薄膜之间，此过程应小心完成，避免膜与膜之间产生气泡。
5、在暗室内进行X-光胶片曝光，或将膜放置到化学发光成像仪内，按照仪器说明书进行检测。
 

问题	可能原因	解决方法
胶片反相(白色条带，黑色背景)	系统中HRP过量	稀释HRP标记物至少10倍以上
膜上出现棕色或黄色条带
暗室中看到强烈发光
发光信号持续时间过短
信号较弱或者无信号	发光反应系统中HRP 过多，消 耗底物过快，引起信号迅速降低	稀释HRP标记物至少10倍以上
	抗原/抗体量不够	增加抗原/抗体使用量
	蛋白转移率低	优化转移系统
高背景	系统中HRP 过量	稀释HRP标记物至少10倍以上
	封闭不足	优化封闭程序
	封闭试剂选择不当	选择另一种封闭试剂
	冲洗不充分	增加冲洗时间，次数
	曝光过度	减少曝光时间
	抗原/抗体浓度过高	降低抗原/抗体使用浓度
蛋白条带为点状	蛋白转移失败	优化转移过程
	膜未平衡	按照说明书处理膜
	胶片与膜之间有气泡	曝光前去除所有气泡
出现非特异条带 (高背景、信号维持时间较短)	系统中HRP过多	稀释HRP标记物
出现非特异条带 (背景干净信号维持时间正常)	一抗用量过多	进一步稀释一抗
	SDS 导致非特异结合	在实验过程中避免使用SDS

储存条件：2～8℃，避光保存